英文名称 :Pectin Esterase (PE) Activity Assay Kit
产品包装 :盒装
产品规格 :50T/48S
储存条件 :2-8℃
检测方法 :NaOH滴定法
有 效 期 :6个月
产品组成:
试剂名称
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50T规格
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100T规格
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保存条件
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提取液
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粉剂×1瓶
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粉剂×2瓶
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室温保存
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试剂一
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粉剂×1瓶
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粉剂×1瓶
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室温保存
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试剂二
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液体1.5 mL×1瓶
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液体3mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂三
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液体10mL×1瓶
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液体20mL×1瓶
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2-8℃保存
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产品说明:
果胶酯酶(Pectinesterase ,PE),又称果胶甲基酯酶、果胶氧化酶,广泛存在于植物及微生物中。果胶是构成植物细胞壁的主要成分之一,而果胶酯酶催化果胶的甲氧酯水解产生果胶酸和甲醇,在植物果实成熟的细胞壁代谢过程中发挥着重要作用,在食品工业中具有极其重要的作用和开发前景。
果胶酯酶催化果胶水解的过程中释放H+ ,反应体系pH值降低,通过加入碱液维持反应体系pH始终维持在7.8 维持pH所消耗的碱液量可反映果胶酯酶的活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果试剂三工作液消耗量过大或过小,建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、天平、研钵/匀浆器、10mL离心管或试管、容量瓶、冰和蒸馏水。
注意事项:
1、 实验中酶促反应产生H+,此时溶液无色透明,需用试剂三调节pH到7.8(粉红色), 即溶液会从无色透明突然变为粉红色。
2、 建议正式实验前进行预实验,其中测定步骤2中,将样本上清液、加入试剂二和试剂一混匀后,用试剂三工作液调节pH至7.8(粉红色)时,可适当调整每次加入试剂三工作液的体积,防止pH调过。
3、 若样本酶活性较高,可适当稀释样本上清液后再进行测定,计算酶活时乘以稀释倍数即可。若样本酶活性较低,建议客户加大样本量后重新进行测定,注意同步修改计算公式。
实验实例:
1. 称取0.51g苹果果肉加入1.5mL提取液进行冰浴匀浆,取1mL上清液于10mL离心管中按照测定步骤操作,
终计得调节pH所消耗试剂三工作液总体积为0.76mL,按样本质量计算酶活得:
PE活性(U/g质量)=25×V÷V上清×V提÷W÷T=0.93 U/g质量。