英文名称 : Ferric chelate reductase Activity Assay Kit
产品包装 : 盒装
产品规格 : 50T/48S
储存条件 : 2-8℃
检测方法 : 可见分光光度法
有 效 期 : 6个月
产品组成 :
试剂名称
|
规格
|
保存条件
|
提取液
|
液体60mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
试剂一
|
液体15mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
试剂二
|
液体15mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
试剂三
|
液体15mL×1瓶
|
2-8℃保存
|
标准品
|
粉剂×1支
|
2-8℃保存
|
产品说明:
双子叶植物和非禾本科单子叶植物采用铁螯合还原反应的高效活化和吸收机制从土壤中获取铁。三价铁还原为二价铁后才能被植物吸收利用。在铁充足时,植物根部的三价铁氧化还原酶将Fe(III)-螯合物中的铁还原并将还原所得Fe2+转运通过细胞质膜进入根细胞内。高铁螯合物还原酶(Ferricchelatereductase,FCR,EC1.16.1.7)催化Fe3+还原为Fe2+,Fe2+和菲洛嗪形成紫色络合物,在562nm下有特征吸收峰。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、低温离心机、分析天平、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、浓硫酸(95%-99%AR)、冰和蒸馏水。
注意事项:
1、如果∆A小于0.010或测定管吸光值接近空白管,可以增加样本量或者延长反应时间后再进行测定;如果∆A大于1或者A1大于1,建议将样本上清用提取液适当稀释后再进行测定。注意同步修改计算公式。
实验实例:
1、称取0.1214g樱桃番茄,加入提取液进行冰浴匀浆,按照测定步骤操作,用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA=A2-A1=0.921-0.082=0.839,ΔA标准=A标准-A空白=0.723-0.044=0.679,带入公式计算:FCR活性(U/g质量)=2.083×ΔA÷ΔA标准÷W=21.020U/g质量。
2、称取0.1002g闽南叶片,加入提取液进行冰浴匀浆,按照测定步骤操作,用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA=A2-A1=0.203-0.088=0.115,ΔA标准=A标准-A空白=0.723-0.044=0.679,带入公式计算:FCR活性(U/g质量)=2.083×ΔA÷ΔA标准÷W=3.521U/g质量。