英文名称 ： Total Protein Thiol Content Assay Kit
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 100T/96S
储存条件 ： 2-8℃
检测方法 ： 微量法
有 效 期 ： 6个月
产品组成 ：
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试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液一
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液体 70 mL×1 瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液体 70 mL×1 瓶
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2-8℃保存
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试剂一
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液体 110 mL×2 瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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液体 20 mL×1 瓶
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2-8℃保存
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试剂三
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液体 7 mL×1 瓶
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2-8℃保存
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试剂四
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液体 1.2 mL×1 支
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2-8℃保存
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粉剂一
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粉剂×1 瓶
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2-8℃保存
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标准品
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粉剂×1 支
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2-8℃保存
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产品说明 ：
巯基的存在使得蛋白质能够进行二硫键的形成，从而维持分子的稳定性和功能性。巯基还参与到氧化还原反应中，具有重要的生物学作用。在细胞内，巯基含量的变化与多种疾病的发生和进展密切相关，因此巯基也成为了生物医学领域中的重要研究对象。
本试剂盒测定的是蛋白质二硫键断裂产生的巯基和本身游离巯基的总和。还原剂会使二硫键裂解生成巯基，巯基会发生亲核反应，即巯基与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应，生成黄色化合物，在412nm处有吸收峰，据此可以计算蛋白质总巯基含量。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、低温离心机、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、丙酮(AR)、蒸馏水。
注意事项：
若样本ΔA测定<0.01，可适当增大样本量后测定，注意同步修改空白管和标准管及计算公式；若样本ΔA测定>1.5，可用试剂一稀释沉淀溶解液后测定，注意同步修改计算公式中的稀释倍数。
实验实例：
1、取100μL马血清，按照测定步骤操作，用96孔板测得ΔA测定=A测定-A对照=0.348-0.045=0.303，ΔA标准=A标准-A空白=0.417-0.105=0.312，按样本液体体积计算蛋白质总巯基含量得：蛋白质总巯基含量(μmol/mL)=2.5×ΔA测定÷ΔA标准×F=2.428μmol/mL。
2、取0.1036g鼠肝，按照测定步骤操作，用96孔板测得ΔA测定=A测定-A对照=0.475-0.107=0.368，ΔA标准=A标准-A空白=0.417-0.105=0.312，按样本质量计算蛋白质总巯基含量得：蛋白质总巯基含量(μmol/g质量)=0.25×ΔA测定÷ΔA标准÷W×F=2.846μmol/g质量。
