英文名称 ： Protein Free Thiol Content Assay Kit
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 50T/24S
储存条件 ： 2-8℃
检测方法 ： 可见分光光度法
有 效 期 ： 6个月
产品组成：
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试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液一
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液体 25 mL×1 瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液体 25mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂一
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液体60mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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液体20mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂三
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液体17mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂四
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液体2mL×1支
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2-8℃保存
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标准品
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粉剂×1 支
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2-8℃保存
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产品说明：
巯基的存在使得蛋白质能够进行二硫键的形成， 从而维持分子的稳定性和功能性。此外， 巯基还参与到氧化 还原反应中， 具有重要的生物学作用。 在细胞内，巯基含量的变化与多种疾病的发生和进展密切相关，因此巯基 也成为了生物医学领域中的重要研究对象。本试剂盒测定的是蛋白质中的游离巯基含量。一定条件下巯基会发生亲核反应，即巯基与5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在 412nm处有吸收峰，据此可以计算蛋白质游离巯基含量。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、低温离心机、 研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、丙酮（AR）、蒸馏水。
注意事项：
1. 若样本ΔA测定<0.01,可适当增大样本量后测定，注意同步修改空白管和标准管及计算公式；若样本ΔA测
定>1.5,可用试剂一稀释沉淀溶解液后测定，注意同步修改计算公式中的稀释倍数。
2.可使用BCA法测定蛋白浓度。
实验实例：
1、取100μL马血清，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得ΔA测定=A测定-A对照=0.110-0.021=0.089，
ΔA 标准=A 标准-A 空白=0.633-0.076=0.557，按样本液体体积计算蛋白质游离巯基含量得： 蛋白质游离巯基含量(μmol/mL）=2.5×ΔA 测定÷ΔA 标准×F =0.399μmol/mL。
2、取0.1036g鼠肝，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得ΔA测定=A测定-A对照=0.339-0.095=0.244，ΔA标准=A标准-A 空白=0.633-0.076=0.557 ,按样本质量计算蛋白质游离巯基含量得：
蛋白质游离巯基含量(μmol/g质量）=0.25×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W×F =1.057μmol/g 质量。
3、取 0.1078g 黄豆粉，沉淀溶解液用试剂一稀释2倍后， 按照测定步骤操作， 用1mL 玻璃比色皿测得 ΔA测定 =A测定-A对照=0.108-0.033=0.075，ΔA标准=A 标准-A空白=0.633-0.076=0.557，按样本质量计算蛋白质游离 巯基含量得：
蛋白质游离巯基含量(μmol/g质量）=0.25×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W×F =0.625μmol/g 质量。
