英文名称 ： α-Ketoglutaric Acid (α-KG) Ccontent Assay kit
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 100T/96S
储存条件 ： -20℃
检测方法 ： 紫外分光光度法
有 效 期 ： 6个月
产品组成：
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试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液一
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液体60mL×1瓶
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2-8℃保存
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提取液二
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液体9mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂一
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液体40 mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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液体4mL×1支
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2-8℃保存
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试剂三
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粉剂×1瓶
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-20℃保存
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试剂四
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粉剂×1瓶
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-20℃保存
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标准品
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粉剂×1支
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2-8℃保存
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产品说明：
α-酮戊二酸(α-Ketoglutarate，α-KG）是三羧酸循环中重要的代谢中间产物，是连接细胞内碳-氮代谢的关键节点。α-酮戊二酸作为一种短链羧酸分子， 是谷氨酰胺、谷氨酸等多种重要的氨基酸的前体， 不仅直接参与供能， 还参与细胞内多种化学反应，具有多种生理作用。
GDH催化NH4+ 、α-酮戊二酸和NADH，生成谷氨酸和NAD+ ，引起340nm吸光度下降。通过测定NADH的变 化，计算α-酮戊二酸含量。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅/金属浴/恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研 钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、蒸馏水和冰。
注意事项：
1. 如果样本 A1 测定＜A1 空白或∆A 测定大于 0.8，可以用蒸馏水对样本进行稀释或者缩短第二步 37℃反应时间；如果∆A 测定小于 0.01，可以加大样本量或者延长第二步 37℃反应时间。最终计算时同步修改计算公式。
2. 提取液一中含有蛋白质沉淀剂， 因此上清液不能用于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量，需另取组织。
3. 温度对该实验影响较大， 务必保持反应温度在 37℃。
实验实例：
称取 0.1066g 小鼠肝脏组织进行样本处理，按照测定步骤操作，用 1mL 石英比色皿测得计算 ΔA 测定=A1 测定-A2 测定=1.201- 1.175=0.026 ，ΔA 标准=A1 标准-A2 标准=1.015-0.487=0.528 ，ΔA 空白=A1 空白-A2 空白=1.080- 1.074= 0.006 。
带入公式计算：
α-KG含量（nmol/g 质量）=475×(ΔA测定-ΔA空白) ÷(ΔA标准-ΔA空白)÷W×F =170.72 nmol/g 质量
