英文名称 ： D-lactate Dehydrogenase(D-LDH)Activity Assay Kit
产品包装 ： 盒装
产品规格 ： 50T/24S
储存条件 ： -20℃
检测方法 ： 可见分光光度法
有 效 期 ： 6个月
产品组成：
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试剂名称
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规格
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保存条件
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提取液
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液体30 mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂一
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液体20mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂二
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粉剂×1支
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-20℃保存
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试剂三
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液体20mL×1瓶
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2-8℃保存
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试剂四
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液体60mL×1瓶
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2-8℃保存
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标准品
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液体1mL×1支
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2-8℃保存
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产品说明：
乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase ,LDH)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，伴随着NAD+/NADH之间互变。根据其催化底物-乳酸构型的不同，可分为D-乳酸脱氢酶(D-LDH ，EC 1.1.1.28 )与L-乳酸脱氢酶(L-LDH ，EC 1.1.1.27 )。
D-LDH催化NAD+氧化D-乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色， 颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、 研钵/匀浆器/细胞超 声破碎仪、冰和蒸馏水。
注意事项：
1.如果测定管吸光值接近空白或ΔA测定过低，可适当加大样本量后重新测定；如果测定管吸光值超过1.5或ΔA测定超过 0.4，建议将样本用提取液适当稀释后进行测定。注意同步修改计算公式。
实验实例：
1 、取0.109g兔肾加入1mL 提取液进行冰浴匀浆，按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.437-0.326=0.111,带入标准曲线 y=0.6126x+0.0162，计算 x=0.155 ，按样本质量计算酶活得：
D-LDH 活性(U/g质量)=66.67×x÷W×F =94.653 U/g质量
2 、取0.1018g 拟南芥加入1mL提取液进行冰浴匀浆，按照测定步骤操作， 用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.256-0.207=0.049，带入标准曲线 y=0.6126x+0.0162，计算x=0.054，按样本质量计算酶活得：D-LDH 活性(U/g质量)=66.67×x÷W×F =35.065 U/g质量
3 、取500万细胞样本加入1mL提取液进行冰浴匀浆， 按照测定步骤操作，用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.249-0.195=0.054，带入标准曲线 y=0.6126x+0.0162，计算x=0.062，按细菌/细胞数目计算酶 活得：
D-LDH 活性(U/10⁴ cell)=0.133×x×F =0.008U/10⁴ cell
4 、取50μL胎牛血清，按照测定步骤操作， 用1mL玻璃比色皿测得计算ΔA测定=A测定-A对照=0.360-0.217= 0.143 ,带入标准曲线 y=0.6126x+0.0162，计算 x=0.207 ，
按液体体积计算酶活得：
D-LDH 活性(U/mL)=66.67×x×F =13.800 U/mL
