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产品简介:
过氧化脂质具有破坏生物膜的作用,导致细胞破坏、机体损伤。以硫代巴比妥酸(TBA)法测定外源添加的脂质过氧化体系的产物丙二醛,最终形成在 535nm 处有特征吸收峰的有色产物。当加入抗脂质过氧化物质(LPO)时,它能抑制外源脂质过氧化体系中产物丙二醛的产生,从而使溶液在 535nm 处光吸收减弱。故可以通过测定 A535 值来评价抗脂质过氧化物质的能力即抑制脂质过氧化(LPO)能力。
试剂盒组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
试剂一
液体15mL×1瓶
4℃保存
试剂二
粉剂mg×3支
4℃保存
临用前甩几下,使粉剂落到底部,每支再
加 3mL 试剂一,超声 20min(周围以冷水
冷却),最后是乳白色液体,三天内用完。
试剂三
液体1mL×1支
4℃保存
用前用蒸馏水稀释 10 倍后再使用。
试剂四
液体18mL×1支
4℃保存
若有沉淀析出,可超声溶解。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、可调式移液器、天平、离心机。
抗脂质过氧化能力(LPO 抑制率)的测定:
1、样本制备:
① 组织样本:称取 0.1g 样本(若是干样可取 0.02-0.05g),加入 1mL 的 80%乙醇(自备)进行匀浆,匀浆后转入 2mL 离心管中;于 50℃,200-300W 条件下超声提取 30min(间隔 5min 振荡混匀一次)。若有损耗需用 80%乙醇定容至 1mL,12000rpm 室温离心 10min,取上清待测。
② 液体:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。