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MM96L人黑色素瘤细胞
产品信息
Catalogue No : C1309
Product Format : a T25 flask
Culture Properties: 贴壁
Complete Growth Medium : 89%H-DMEM+10%FBS+1%双抗
Atmosphere : air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Application : Cells and cancer research
NOTE : FOR RESEARCH USE ONLY
细胞培养操作步骤
1. 吸走用于培养基,加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞。
2. 吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面,培养瓶放37度培养箱消化;(细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞完全漂浮。混匀细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。)
3. 加入6-8ml完全培养基终止消化,轻轻吹下细胞混匀。
4. 将混匀的细胞1000rpm(约150g)离心3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养。
传代比例 : 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。
细胞保存
1. 冻存液:92%完全培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)小提示
1. 细胞经过运输后,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。贴壁细胞可以消化,悬浮细胞直接混匀收集细胞,900-1000rpm(约150g)离心3min,弃上清。加5ml PBS重悬细胞,再900-1000rpm(约150g)离心3min,用新鲜的完全培养基重悬接种到新的培养瓶。第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。
MM96L人黑色素瘤细胞
注意事项