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大鼠直肠平滑肌细胞

品牌:纪宁生物

货号:JN25139

规格: 5×10⁵Cells

联系方式:021-66980655

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产品详情

大鼠直肠平滑肌细胞
基本信息
产品名称 :大鼠直肠平滑肌细胞
产品品牌 :纪宁生物
组织来源 :直肠组织
产品规格 :5×105cells/T25细胞培养瓶


细胞简介  

大鼠直肠平滑肌细胞分离自直肠组织。直肠为大肠的未段,位于小骨盆内。上端平第3骶椎处接续乙状结肠,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿过盆膈,下端以肛门而终。直肠上端的大小似结肠,其下端扩大成直肠壶腹,是粪便排出前的暂存部位,最下端变细接肛管。直肠在盆腔内的位置与骶椎腹面关系密切,与骶椎有相同的曲度。

直肠周围多脂肪、无纵带,位于膀胱和生殖器官的背侧。直肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中。2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏。细胞密度低时,常交织成网状。密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。

直肠的动脉血供主要是来自肠系膜下动脉的直肠上动脉,来自髂内动脉的直肠中动脉和来自髂内动脉的直肠下动脉。平滑肌收缩是胃肠蠕动中基本的运动方式。肠炎时由于平滑肌特殊肌动蛋白的增加导致了平滑肌层的增厚。平滑肌肌动蛋白可能影响收缩力的产生,这进一步证明了炎症时的肠平滑肌细胞具有可塑性。利用肠平滑肌细胞的培养,可以帮助了解收缩、增殖和胃肠道结缔组织对平滑肌细胞的反应。


方法简介

纪宁生物实验室分离的大鼠直肠平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原纪宁合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。


质量检测

纪宁生物实验室分离的大鼠直肠平滑肌细胞经α-SM A 免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。


培养信息

培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :成纤维细胞样
传代特性 :可传5代左右。3代以内状态最佳
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%
大鼠直肠平滑肌细胞体外培养周期有限。建议使用纪宁生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。


细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片


使用方法

大鼠直肠平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在纪宁生物技术部标准操作流程下,细胞可传5代左右。3代以内状态最佳。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。


客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作

1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入3-5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,调整合适密度按实验需求接种对应实验器皿,然后按器皿大小补
充适当新鲜的完全培养基,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察,用于实验。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。


大鼠直肠平滑肌细胞

注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和纪宁生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们纪宁系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
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