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基本信息
产品名称 :小鼠骨髓基质细胞
产品品牌 :纪宁生物
组织来源 :骨髓
产品规格 :5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
小鼠骨髓基质细胞分离自骨髓。骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种 :红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等。某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。
骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨) 的骨髓腔和扁平骨(如髂骨) 的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。
骨髓基质细胞是一类具有多向分化潜能的干细胞,其中部分细胞有自我复制、高度增殖和多向分化能力,在特定培养条件下可向骨、软骨、神经胶质细胞、心肌、骨胳肌、脂肪细胞、血管内皮细胞等间叶组织细胞转化。骨髓基质细胞在自然条件下主要分化为成骨细胞,在不同的培养条件下其分化途径不同,其在成骨细胞与成脂细胞分化之间呈反向变化。
方法简介
纪宁生物实验室分离的小鼠骨髓基质细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
纪宁生物实验室分离的小鼠骨髓基质细胞经C D 29、C D 44免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :成纤维细胞样
传代特性 :可传3代左右
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%
小鼠骨髓基质细胞体外培养周期有限。建议使用纪宁生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
小鼠骨髓基质细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,在纪宁生物技术部标准操作流程下,细胞可传3代左右。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和纪宁生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们纪宁系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。