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基本信息
产品名称 :小鼠腮腺细胞
产品品牌 :纪宁生物
组织来源 :腮腺组织
产品规格 :5×105cells/T25细胞培养瓶
细胞简介
小鼠腮腺细胞分离自腮腺组织。腮腺是哺乳类动物口腔中位于下颌角处的最大唾液腺,位于外耳道的前下方,下颌后窝内及下颌支的深面。腮腺也是某些无尾目动物颈部有毒皮肤腺的聚集体。唾液腺有3对,腮腺、舌下腺和颌下腺,其中最大的一对是腮腺。腮腺细胞是高度分化的上皮源性细胞,是一种营养需要复杂、在一般合成培养基中不易生长,体外培养比较困难。
目前,D M EM 培养液被认为较适于腺细胞的培养。加入一定量的血清更有利于细胞的生长、增殖与分化。另外,接种的细胞密度也是培养成功的关键因素之一,尤其是在腺细胞这种单层细胞培养时,接种的细胞总数量和生长基质表面的细胞密度对整个细胞的生长均有影响。
方法简介
纪宁生物实验室分离的小鼠腮腺细胞采用胶原酶-胰蛋白纪宁合消化后差速贴壁,结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
纪宁生物实验室分离的小鼠腮腺细胞经PC K 免疫荧光鉴定,纯度可达90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
包被条件 :鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
培 养 基 :含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 :每2-3天换液一次
生长特性 :贴壁
细胞形态 :梭形、多角形
传代特性 :不建议传代
传代比例 :1:2
消 化 液 :0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 :气相 :空气,95% 。C O2,5%
小鼠腮腺细胞体外培养周期有限。建议使用纪宁生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
小鼠腮腺细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈梭形、多角形,在纪宁生物技术部标准操作流程下,细胞不建议传代。建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作
1. 取出T 25细胞培养瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5m L,置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0. 1m g/m l),明胶(0. 1% ),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和纪宁生物技术部沟通。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们纪宁系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。