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基本信息
产品名称 ： 兔尿道平滑肌细胞
产品品牌 ： 纪宁生物
组织来源 ： 尿道组织
产品规格 ： 5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
兔尿道平滑肌细胞分离自尿道管组织；尿道是从膀胱通向体外的管道。起自膀胱的尿道内口，止于尿道外口，行程中通过前列腺部、膜部和阴茎海绵体部，尿道在尿道膜部有一环横行纹肌构成的括约肌，称为尿道外括约肌，由意识控制。尿道有三个解剖上的较狭部和膨大部，前者分别位于外口、膜部和内口，后者位于舟状窝、球部和前列腺部。尿道壁为粘膜层、粘膜下层和肌肉层所组成。
在前尿道的外面，还包有丰富的弹力纤维和平滑肌纤维的尿道海绵体。尿道粘膜上皮在前列腺部为移行上皮(近膀胱部)，一部分为多列或复层柱状上皮，在有尿道海绵体的一部分尿道，主要为复层柱状上皮，在皱襞上也有单层柱状上皮。特别在舟状窝内有许多环状细胞，舟状窝的远端部开始有未角化的复层鳞状上皮。粘膜下层血液供应丰富，主要为结缔组织。肌肉层有纵行肌和外环形肌。
方法简介
纪宁生物实验室分离的兔尿道平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法，并通过平滑肌细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
纪宁生物实验室分离的兔尿道平滑肌细胞经α-SM A 免疫荧光鉴定，纯度可达90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息
培 养 基 ： 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 ： 每2-3天换液一次
生长特性 ： 贴壁
细胞形态 ： 成纤维细胞样
传代特性 ： 可传3-5代左右
传代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0.25% 胰蛋白酶
培养条件 ： 气相：空气，95% ；C O2，5%
兔尿道平滑肌细胞体外培养周期有限；建议使用纪宁生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
兔尿道平滑肌细胞是一种贴壁细胞，细胞形态呈成纤维细胞样，在纪宁生物技术部标准操作流程下，细胞可传3-5代左右；建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作
1.取出T 25细胞培养瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2.贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。
2) 添加0.25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1-3min；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化。
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至5m L，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4)待细胞完全贴壁后，培养观察；之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验；包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0.1m g/m l），明胶（0.1% ），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
兔尿道平滑肌细胞
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和纪宁生物技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
