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基本信息
产品名称 ： 猪雪旺氏细胞
产品品牌 ： 纪宁生物
组织来源 ： 神经组织
产品规格 ： 5×105cells/T 25细胞培养瓶
细胞简介
猪雪旺氏细胞分离神经组织。周围神经系统中的神经胶质细胞称施万（schwann，又名雪旺细胞）细胞，它沿神经元的突起分布。施万细胞包裹在神经纤维上，这种神经纤维叫有髓神经纤维。有髓神经纤维和无髓神经纤维的施万细胞的形态和功能有所差异，施万细胞的外表面有基膜，能分泌神经营养因子，促进受损的神经元的存活及其轴突的再生，参与周围神经系统中神经纤维的构成。
施万细胞的胞核呈长卵圆形，其长轴与轴突平行，核周有少量胞质。由于施万细胞包在轴突的外面，故又称神经膜细胞（neurilemmalcell），它的外面包有一层基膜。施万细胞最外面的一层胞膜与基膜一起往往又称神经膜（neurilem m a），光镜下可见此膜。在有髓神经纤维发生中，伴随轴突一起生长的施万细胞表面凹陷成一纵沟，轴突位于纵沟内，沟缘的胞膜相贴形成轴突系膜（m esaxon）。
轴突系膜不断伸长并反复包卷轴突，把胞质挤至细胞的内、外边缘及两端（即靠近郎氏结处），从而形成许多同心圆的螺旋膜板层，即为髓鞘。故髓鞘乃成自施万细胞的胞膜，属施万细胞的一部分。施万细胞的胞质除见于细胞的外、内边缘和两端外，还见于髓鞘板层内的施－兰切迹。该切迹构成螺旋形的胞质通道，并与细胞外、内边缘的胞质相通。
方法简介
纪宁生物实验室分离的猪雪旺氏细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测
纪宁生物实验室分离的猪雪旺氏细胞经S-100免疫荧光鉴定，纯度可达90% 以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等
培养信息
培 养 基 ： 含FBS、bFG F、Insulin、Penicillin、Streptom ycin等
换液频率 ： 每2-3天换液一次
生长特性 ： 贴壁
细胞形态 ： 双极、多极形
传代特性 ： 可传1-2代
传代比例 ： 1:2
消 化 液 ： 0. 25% 胰蛋白酶
培养条件 ： 气相：空气，95% 。C O2，5%
猪雪旺氏细胞体外培养周期有限。建议使用纪宁生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
使用方法
1. 取出T 25细胞培养瓶，用75% 酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1）吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。
2）添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃温浴1min。倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完全培养基终止消化。
3）用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完全培养基至
5m L，置于37℃、5% C O 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。
4）待细胞完全贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 复苏操作说明
1. 准备好37度水浴锅，预热至37度。
2. 准备好T25培养瓶，加入10ml完全培养基（培养基量必须大于冻存液10倍体积）。
3. 取出干冰内冻存细胞管，用EP手套包裹冻存管（防止管内进水导致污染），迅速放于水浴锅内，于1min内融化完全。
4. 取出冻存管，酒精喷洒消毒后擦干，置于超净台内。
5. 吸取冻存管内细胞悬液，加入步骤2中准备好的T25培养瓶内，8字缓慢摇匀。
6. 培养瓶放于37度C O 2恒温培养箱内，静置培养24h，更换新鲜换培养基（注意贴壁细胞、悬浮细胞不同换液操作方法）。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚赖氨酸PLL（0. 1m g/m l），明胶（0. 1% ），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
猪雪旺氏细胞
注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中，胰酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和纪宁生物技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
