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从骆驼奶和奶牛乳清蛋白中分离纯化抗菌肽,并对其抗菌活性进行了研究。用胰蛋白酶水解乳清蛋白,凝胶电泳鉴定水解程度,超滤纯化乳清水解物(WH),葡聚糖凝胶层析得到抗菌活性小肽。利用透射电镜研究了抗菌肽对细菌形态的影响。测定其氨基酸组成及抗菌活性。多肽CaWHⅢ(<3kda)和CoWHⅢ(<3kda)具有最强的抗菌活性。Fr.A2(CaWHⅢ组分2)和Fr.B1(CoWHⅢ组分1)对大肠杆菌和葡萄球菌均有抗菌作用,Fr.A2的最低抑菌质量浓度分别为65mg/mL和130mg/mL,Fr.B1的最低抑菌质量浓度分别为130mg/mL和130mg/mL。高效抗菌肽含有大量的碱性氨基酸(28.13%的骆驼乳Fr.A2和25.07%的牛乳B1)和疏水性氨基酸。结果表明,用胰蛋白酶水解CaW和奶牛产生了多种有效的抗菌肽,其抗菌活性略高于牛乳乳清。
从骆驼奶和奶牛乳清蛋白中分离纯化抗菌肽,并对其抗菌活性进行了研究。用胰蛋白酶水解乳清蛋白,凝胶电泳鉴定水解程度,超滤纯化乳清水解物(WH),葡聚糖凝胶层析得到抗菌活性小肽。利用透射电镜研究了抗菌肽对细菌形态的影响。测定其氨基酸组成及抗菌活性。多肽CaWHⅢ(<3kda)和CoWHⅢ(<3kda)具有最强的抗菌活性。Fr.A2(CaWHⅢ组分2)和Fr.B1(CoWHⅢ组分1)对大肠杆菌和葡萄球菌均有抗菌作用,Fr.A2的最低抑菌质量浓度分别为65mg/mL和130mg/mL,Fr.B1的最低抑菌质量浓度分别为130mg/mL和130mg/mL。高效抗菌肽含有大量的碱性氨基酸(28.13%的骆驼乳Fr.A2和25.07%的牛乳B1)和疏水性氨基酸。结果表明,用胰蛋白酶水解CaW和奶牛产生了多种有效的抗菌肽,其抗菌活性略高于牛乳乳清。
表1不同分子质量段乳清组分抗菌活性与抗菌活性的关系
图1骆驼乳清和牛乳乳清水解时间(分别为30、60、90、120、180240、300和360分钟)对DH(水解度)的影响
图2使用葡聚糖凝胶从Sephadex G-25色谱柱中洗脱骆驼乳清水解肽III(CaWH III)(A)和奶牛乳清水解肽III(CoWH III)(B)的剖面图
表2牛乳(奶牛)和骆驼乳(CaW)乳清蛋白抗菌肽提取物的最低抑菌浓度(MIC)
表3各组分氨基酸组成分析