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疏螺旋体素(又称勃利霉素,Borrelidin)是一个带有环戊烷羧酸的和共轭的氰二烯特征结构的十八元大环内酯化合物,最早由Berger等人在1949年从娄彻氏链霉菌(Streptomycete rochei)代谢产物中分离得到。疏螺旋体素除了具有广泛的抗细菌、抗真菌和抗疟作用以外,还具有良好的抑制新生血管生成活性(IC50=0.8nM),是目前抗肿瘤药物研究开发的热点化合物之一。
利用加纳链霉菌(S.ghanaensis)TRM78-24发酵并制备疏螺旋体素
接种加纳链霉菌(S.ghanaensis)TRM78-24少量孢子粉于ISP4培养基中,28℃培养4d,获得种子液,取2mL(8 %的接种量)种子液接种于小米发酵培养基内发酵培养,发酵条件为:转速180 rpm,初始pH 7.2-7.4,装液量250mL,发酵温度28℃,发酵7d。收集发酵液,用四层纱布过滤发酵液,湿法上样到大孔树脂色谱柱(发酵滤液每100L装填D101或AB-8大孔树脂2.0kg);然后分别用50%乙醇-水溶液、95%乙醇-水溶液洗脱;95%乙醇洗脱液,减压浓缩去掉溶剂后得到富含疏螺旋体素的95%乙醇浸膏,继而通过ODS中压柱色谱,分别用50%甲醇-水及100%甲醇洗脱。100%甲醇洗脱部位继而用70%甲醇-水制备获得疏螺旋体素纯品,HPLC分析显示该发酵液中疏螺旋体素的含量为12.0mg/L,实际制备量为6.6mg/L。
[1] [中国发明,中国发明授权] CN201610229401.3 一种产生疏螺旋体素的放线菌及其应用