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次黄嘌呤(Hx)又名6-羟基嘌呤。白色针状结晶。150℃分解。溶于稀酸及碱液,微溶于沸水,不溶于冷水。存在于转移核糖核酸中。次黄嘌呤(hypoxanthine,Hx)是核苷的代谢产物,是一种重要的生物碱嘌呤,参与调节人体的一些生理机能。有研究发现Hx能促进小鼠的脂肪分解,起到降低体内脂肪质量的作用。Hx对营养性肥胖小鼠的抗肥胖研究结果显示:给药4 周后,Hx给药组可以有效的降低肥胖小鼠体质量、总脂肪质量、Lee’s指数和脂肪系数,其中Hx低剂量组与模型组差异最明显。
血清方面,与模型组相比较,Hx中、低剂量组能降低小鼠血清中的TC、TG含量,增加脂联素含量,瘦素水平明显受到了抑制,其中Hx低剂量组对治疗小鼠的高脂血症作用最为明显。小鼠的肥胖情况与肝脏中SOD活性和MDA含量均有密切联系,与模型组相比较,Hx具有抑制SOD、MDA活性的作用,且Hx低剂量组差异性最为明显。Hx通过调节SOD、MDA的活性,能有改善实验小鼠肝组织情况,减少体内脂肪分解吸收,达到减肥作用。综上判断Hx对实验小鼠具有减重降脂功能,其中低剂量组的效果最显著。
HPLC法:
(1) 色谱条件:色谱柱:YWG-C18柱(4.6mm×150mm;10μm);流动相:水-甲醇-四氢呋喃(100:0.1:0.05);流速:1.0ml/min;检测波长:260nm;温度:25℃;柱压:0.03Pa。
(2) 对照品溶液的配制:精密称取次黄嘌呤、黄嘌呤对照品适量,加水微热溶解并制成每毫升含次黄嘌呤0.075mg、黄嘌呤0.05mg的混合溶液,作为对照品溶液。
(3)样品溶液的制备:精密称取僵蚕细粉约0.2g,置10ml具塞试管中,加水10ml超声提取30min,离心10min(3500r/min),取上清液。残渣按上述步骤再提取2次,合并上清液,浓缩后定容至10ml,作为样品溶液。
(4)测定:精密量取样品溶液和对照品溶液各10ml,按上述色谱条件测定。
(5)色谱图:
A.标准品;B.样品
1.次黄嘌呤,tR=7.56min;2.黄嘌呤,tR=9.70min
次黄嘌呤可用作生物培养剂,也用于生化研究;用作巯嘌呤和硫唑嘌呤的原料。其应用举例如下:
1. 制备6-巯基嘌呤。
6-巯基嘌呤是一种天然嘌呤碱的合成类似物,它主要被用来减慢癌细胞的生长,用于成人和儿童急性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病效果较好;另外,对绒毛膜上皮癌、恶性葡萄胎、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤也有一定疗效。方法是以五硫化二磷、苯甲醚和次黄嘌呤为原料,在容器中加热合成得到6-巯基嘌呤;其中,五硫化二磷与苯甲醚的摩尔比为1∶2~30,次黄嘌呤与五硫化二磷的摩尔比为1∶0.5~5。
分两种方式:一是一锅法,将五硫化二磷和苯甲醚置于容器中,在60~160℃下加热,全溶后加入次黄嘌呤在60~190℃下加热反应;或是将五硫化二磷、苯甲醚和次黄嘌呤同时置于容器中,在60~160℃下加热反应;薄层检测次黄嘌呤消失为反应终点,得到固形物,将固形物重结晶得到6-巯基嘌呤水合物。
二是分步法,将五硫化二磷和苯甲醚置于容器中,在60~160℃下加热,反应1~3小时后冷却,得到结构如式(II)的对甲氧基苯基硫代硫化膦二聚体;在该对甲氧基苯基硫代硫化膦二聚体中加入有机溶剂后,再加入次黄嘌呤在60~190℃下加热反应,薄层检测次黄嘌呤消失为反应终点,得到固形物,将固形物重结晶得到6-巯基嘌呤水合物。6-巯基嘌呤的水合物可在100~140℃下加热脱水得到无水6-巯基嘌呤。
2. 制备6-氯嘌呤。
6-氯嘌呤是合成腺嘌呤的主要中间体之一,其经6-位氨化即得到腺嘌呤。腺嘌呤,化学名为6-氨基嘌呤,其衍生物在医药及农用化学品等领域应用广泛。比如,它是合成维生素B4(腺嘌呤磷酸盐)的主要原料。
所述的方法以双(三氯甲基)碳酸酯和如式I所示的次黄嘌呤为原料,在有机溶剂中在有机胺催化剂的作用下于0~150℃反应4~10小时,过滤取滤饼得到6-氯嘌呤盐酸盐,将所述的滤饼溶于冰水,用碱调pH7~9,6-氯嘌呤析出,过滤除去滤液,烘干即得6-氯嘌呤;所述的反应物投料物质的量比次黄嘌呤∶双(三氯甲基)碳酸酯∶有机胺催化剂为1∶0.33~0.66∶0.1~1。本发明操作简单安全、反应收率较高、生产成本低,后处理简单,从工艺上消除了传统方法安全隐患大、三废污染严重等问题,具有较大实用价值。
可以氰乙酸乙酯为原料制得4,5-二氨基- 6-羟基嘧啶,再与甲酸环合而得。
[1] 化学物质辞典
[2] 顾效瑜, 李哲, 郑毅男, 等. 次黄嘌呤对营养性肥胖小鼠的抗肥胖作用[J]. 食品科学, 2016, 37(15): 253-258.
[3] 天然药物成分定量分析
[4] 张传伟;林吉茂;邓兵.一种工业化制备6-巯基嘌呤的方法.CN201010107052.0,申请日20100209
[5] 翁建全;李永曙;谭成侠;刘会君;颜贻意.一种6-氯嘌呤的合成方法.CN200910100306.3,申请日20090702