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无花果系桑科无花果属植物（FicusCaricaL)，无花果的果实中含有多种人体所需的氨基酸，并且含有丰富的VA和VC等多种维生素，不仅口味甘美，而且具有极大的药用价值。在中医上，无花果主要用于"健胃清肠，消肿解毒"以及治疗肠炎、痢疾、痔疮等。无花果叶除可以治疗痔疮、肿毒、心痛外，还具有一定的抗高血压和抗癌作用。无花果叶提取物具有极强的抑菌活性，可作为天然防腐剂用于食品中。补骨脂素和佛手内酯是无花果叶提取物中的主要抑菌成分。补骨脂素还可引起光过敏，注射或内服此等物质，再以长波紫外线或日光照射，可使受照射处之皮肤红肿、色素增加，甚至表皮增厚；还可用来治疗白癜风。
高速逆流色谱技术（High-SpeedCountercurrentChromatography，HSCCC)是近30年发展起来的一种连续的无需任何固体支持物的高效、快速的液液分配色谱分离技术，其原理是利用螺旋柱在行星式的运动时产生的离心力，使互不相溶的两相不断混合，同时保留其中的一相（固定相），利用恒流泵连续输入另一相（流动相），随流动相进入螺旋柱的溶质在两相之间反复分配，按分配系数的次序，被依次洗脱。在流动相中分配比例大的先被洗脱，反之，在固定相中分配比例大的后被洗脱。传统的液相色谱技术进行制备量分离时，分配效率低，溶剂消耗量大，而且固态支持体或载体会带来样品被吸附、损耗和变性等问题；而HSCCC能保证较高峰型分辨率，具有操作简便，分离量大，样品无损耗，分离效率高，理论回收率为100%，重现性好和分离环境缓和等优点，现已广泛应用于生物、医药、环保等领域化学物质的制备分离和纯化。
本发明所要解决的技术问题是提供一种高纯度佛手柑内酯和补骨脂素的制备方法。该方法克服传统分离技术的缺陷，采用高速逆流色谱法（HSCCC)制备高纯度的佛手柑内酯和补骨脂素，该方法操作简便，回收率高，分离量大。
本发明的一种高纯度佛手柑内酯和补骨脂素的制备方法，包括：
(1)将A组分、B组分、C组分和D组分按体积比1-5:0.5-1.5:1-5:1-10混合后置于分液漏斗中，摇匀静置分层，待平衡20-40分钟后，将上相和下相分开，即得该溶剂体系；其中A组分为乙酸甲酯、乙酸乙酯或乙酸丁酯；B组分为正丙醇或正丁醇；C组分为乙醇或甲醇；D组分为水；
(2)选择上相为固定相，下相为流动相，先用固定相充满逆流色谱仪柱子，调节主机转速为600-1000rpm，将流动相以0.5-5.0ml/min的流速泵入柱内，待整个体系建立动态平衡后，由进样阀进样；
(3)根据检测器紫外图谱接收目标成分，将流分进行浓缩、结晶，得到佛手柑内酯和补骨脂素。
上述溶剂体系优选为乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水体系。
所述步骤（2)中所进的样的制备方法为：将无花果提取物溶于上相和下相中。
所述步骤⑴中的溶剂体系为乙酸乙酯-正丙醇-甲醇-水，该四组分的体积比依次为：1:1.5:1:1;所述步骤（2)中的主机转速850rpm，流动相泵入柱内的流速为5.0ml/min。
所述步骤⑴中的溶剂体系为乙酸甲酯-正丙醇-乙醇-水，该四组分的体积比依次为：4:0.8:2:6;所述步骤（2)中的主机转速950rpm，流动相泵入柱内的流速为3.0ml/min。
所述步骤⑴中的溶剂体系为乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水，该四组分的体积比依次为：3:0.5:1:8;所述步骤（2)中的主机转速650rpm，流动相泵入柱内的流速为0·5ml/min。
所述步骤⑴中的溶剂体系为乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水，该四组分的体积比依次为：2:0.5:4:2;所述步骤（2)中的主机转速600rpm，流动相泵入柱内的流速为0·5ml/min。
所述步骤⑴中的溶剂体系为乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水，该四组分的体积比依次为：3:1:5:9;所述步骤（2)中的主机转速700rpm，流动相泵入柱内的流速为4.0ml/min。
所述步骤⑴中的溶剂体系为乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水，该四组分的体积比依次为：5:0.7:1:10;所述步骤（2)中的主机转速800rpm，流动相泵入柱内的流速为2.0ml/min。
所述步骤⑴中的溶剂体系为乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-水，该四组分的体积比依次为：5:1.5:3:5;所述步骤（2)中的主机转速1000rpm，流动相泵入柱内的流速为3.0ml/min。
所述步骤（1)中的溶剂体系为乙酸丁酯-正丙醇-乙醇-水，该四组分的体积比依次为：4:1:1:6;所述步骤（2)中的主机转速750rpm，流动相泵入柱内的流速为4.0ml/min。
根据溶解度常数，在不破坏体系平衡的情况下，调节A，B，C，D四组分的体积比。
高纯度是指纯度多98%，经一次分离得到佛手柑内酯和补骨脂素纯品，纯度在98%以上。
实验条件适合温度20-40°C，在上述温度范围内，温度较高时，出峰时间略有提前，分离效果变化不大，对峰形无多大影响。
主机转速和流速需控制在一定范围内，按体积比将溶剂体系置于分液漏斗中，摇匀静置分层。待平衡一定时间后，将上相和下相分开，采用TBE-300B高速逆流色谱仪，该机型柱体积为300ml，进样圈为20ml，配有TBP-50A泵，TBD-23检测器和N2000色谱工作站。进样前，先用固定相充满整个柱子，调整主机转速为600-1000rpm，以0.5-5.0ml/min的流速将流动相泵入柱内。
分离和收集到的目标成分，浓缩到一定纯度后再进行结晶得到单体。
本发明采用了高速逆流色谱分离技术克服了固态支持物或载体不可逆吸附、损耗和变性，使被分离物回收率高理论达100%，本发明实际达到95%以上，又因为采用优选的溶剂体系，控制实验条件温度、调整主机转速和流速的工艺条件，可以高效率的分离，获得高纯度的佛手柑内酯和补骨脂素（达到98%以上）。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
选取乙酸甲酯-正丙醇-乙醇-水体系在半制备型逆流色谱仪上来分离纯化佛手柑内酯和补骨脂素。实验条件适合温度为25°C，先按4:0.8:2:6体积比将上述溶剂组分分配置于分液漏斗中，振摇后静置分层。待平衡一段时间后，将上相和下相分开。采用半制备型逆流色谱仪，配有聚四氟乙烯柱，20ml进样阀，柱容积为300ml，配有TBP-50A泵，TBD-23检测器和N2000色谱工作站。称取300mg无花果粗样溶解于10ml上相和10ml下相组成的溶液中待用。进样前，先用固定相充满整个柱子，调整主机转速为950rpm，以3.0ml/min的流速将流动相泵入柱内；待整个体系建立动态平衡后，由进样阀进样，然后根据检测器紫外图谱，接收目标成分，得到佛手柑内酯和补骨脂素流分，浓缩冻干后进行结晶，其HPLC纯度达到98.5%。