手机扫码访问本站
微信咨询
2'-脱氧鸟苷一水合物是2’-脱氧鸟苷的水合物。2’-脱氧鸟苷是合成寡脱氧核苷酸等抗病毒、抗肿瘤核酸药物的重要原料。2＇-脱氧鸟苷是一种天然的脱氧核苷，可直接用于制备组合脱氧核苷药物或者作 为化学试剂用于生化研究；同时可作为中间体用于合成一些抗病毒核苷类药物以及分子标 记物，如文献（Journal of Medicinal Chemistry,1985, 28：1194-1198）以2’-脱氧鸟苷原料合成8-溴-2’-脱氧鸟苷和8-羟基-2’-脱氧鸟苷等重要分子标记物；文献（Tetrahedron Letters,1982,23 (22):2253-2256,1982 Tetrahedron Letters,1990，31(3):319-322）中 报道了合成2’-脱氧鸟苷的6位衍生物，如6-甲氧基、6-氨基等系列重要抗肿瘤的2’-脱氧鸟苷衍生物；另外中国专利CN201110114010公开报道了采用2’-脱氧鸟苷为原料合成致癌或抗癌过程中的重要分子标记物N7-鸟嘌呤烷化物。
在250ml三角瓶中装入50ml培养基，其中，含牛肉膏1％，蛋白胨1％，酵母膏0.5％，NaCl 0.5％，pH 7.0，于118℃灭菌30min，冷却后接入乙酰短杆菌QD96，于30℃振荡(200r/min)培养16h，将培养液经4000r/min冷冻离心30min，再用0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)洗涤，再离心，所得之菌体冷藏保存，作为核苷酸磷酸化酶备用。
在100ml圆底烧瓶中，装入50ml底物溶液，其中含鸟苷酸和胸苷浓度各为40mol/L，磷酸缓冲液为25mmol/L，菌体加入量为5％(湿重)，在恒温水浴中60℃搅拌反应2h，反应完毕，冷冻离心去除菌体和少量胸腺嘧啶沉淀物。然后将溶液经HPLC检测其中含24mmol/L脱氧鸟苷，其转化率达60％。经阴离子交换树脂分离，可获得0.26g脱氧鸟苷。
1）产酶菌体的收集与预处理
产酶菌株发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum ) CGMCC 1.1880在上述公知的 产酶培养条件下进行繁殖生长并富产脱氧核苷核糖转移酶，得1升产酶发酵液，采用离心 （离心条件：6000转/分钟，离心20分钟），收集得到57克菌体浆状物，然后用500毫升去离子 水将菌体重新制成菌悬液并搅拌10分钟进行洗涤菌体，然后再上述相同的离心条件离心收 集菌体，得到53克洗涤后的菌体浆状物。然后用1升0.5M磷酸缓冲液（pH8.0）洗涤，再经同样 条件离心得到50克菌体浆状物。该菌体浆状物即为制备2’-脱氧鸟苷的生物催化剂。
2）生物催化合成2’-脱氧鸟苷
先在2升反应器将用800毫升去离子水使25克聚乙醇10000（PEG 10000）溶解完全， 然后一边搅拌一边加入30克磷酸二氢钾，溶解完全后，加入16.5克β-胸苷和10.3克鸟嘌呤， 搅拌混合均匀。然后再加入步骤1）所得到50克菌体浆状物，同样搅拌使菌体分撒均匀。接着 用去离子水定容至1升，最后用5M氢氧化钾溶液将转化体系的pH值调至8.0。pH值调节完毕 后，置于水浴中，将反应温度升至40℃进行生物催化反应，反应过程中一直搅拌。反应36小 时后，取样测定β-胸苷转化率和产物2’-脱氧鸟苷产率。测定方法采用高效液相色谱法 （HPLC），其检测方法如下所示：
色谱柱：Diamonsil C18，5um， 250 x 4.6mm；流动相：甲醇：0.02mol磷酸钾缓冲盐= 20：80；流速：0.8ml/min；检测波长：254nm
HPLC分析结果显示，β-胸苷转化率为72%，产物2’-脱氧鸟苷产率为13.1 g/L。
一种6-双硫取代-2’-脱氧鸟苷类化合物及其制备方法和在抗肿瘤药物中的应用，本发明以2’-脱氧鸟苷作为结构母核，设计并合成了系列全新的硫氧还原蛋白-1(Trx-1)抑制剂，并对该类化合物进行了Trx-1活性抑制测试，显示出明显的抑制活性。体内外研究表明，这些化合物对多种类型肿瘤表现出显著的抑瘤作用，可应用于人体细胞增殖相关的肿瘤的药物中，为抗癌药物的研究提供了新的途径。
[1] [中国发明] CN201010611733.0 用乙酰短杆菌的核苷磷酸化酶合成2’-脱氧鸟苷的方法
[2] [中国发明,中国发明授权] CN201510140553.1 一种核苷类药物中间体2’-脱氧鸟苷的生产方法
[3] CN201811003442.66-双硫取代-2’-脱氧鸟苷类化合物及其制备方法和应用