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多聚左旋赖氨酸(PLL)是一种人工合成的多聚肽,自身免疫原性很差但可以增加半抗原的免疫性,且具有更多的自由氨基,可以大大提高载体蛋白质与半抗原的偶联率,所以近来年被越来越多的用以人工免疫抗原的制备中,多聚右旋赖氨酸为多聚左旋赖氨酸的异构体。
多聚右旋赖氨酸可用于在石墨烯三维微电极阵列芯片上进行细胞培养和检测:
(1)石墨烯三维微电极阵列的表面处理:在接种细胞前,石墨烯三维微电极在75%的乙醇溶液中浸泡一小时后,紫外灯下晾干;然后将多聚右旋赖氨酸(PDL)溶液按照2μg/cm2的浓度滴加在石墨烯三维微电极阵列表面,常温过夜,再用超纯水冲洗三遍,风干。
(2)石墨烯三维微电极阵列表面接种细胞:用消化液(0.25%胰蛋白酶,0.02%EDTA溶液)将常规培养的SH-SY5Y细胞消化、离心、吹打,以1.0×107cells/mm3的密度接种于石墨烯三维微电极阵列芯片上。
(3)SH-SY5Y细胞诱导分化:因全反式维甲酸能诱导SH-SY5Y分化为神经细胞,所以培养液采用含有10nM全反式维甲酸、10%的胎牛血清、0.11g/L丙酮酸钠、300mg/L谷氨酰胺的MEM/F12培养基;因维甲酸光不稳定,培养过程中避光,每天换液。
(4)细胞检测:培养5天后,将石墨烯三维微电极阵列芯片固定于多通道电信号检测系统的夹具中,然后将夹具放于倒置显微镜的样品台上,在进行成像观察的同时记录细胞产生的自发动作电位。
[1] CN201510885266.3一种石墨烯三维微电极阵列芯片、方法及其应用