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固绿FCF(fastgreenFCF,分子式为C37H34N2O10S3Na2)是一种生物染色剂,可作为蛋白质的定性标记试剂,主要用作实验室研发和生物研究过程中。
1)固绿FCF分光光度法测定血清蛋白质。
在pH1.4的ClarkLubs缓冲介质中,固绿FCF与血清蛋白质作用在室温下能迅速结合形成复合物,其最大吸收波长为660nm,比固绿FCF本身红移了36nm。用分光光度法研究了该结合反应的最佳条件,并在此基础上建立了测定蛋白质的新方法。在660nm处各蛋白质浓度至少在5~70mgL的范围内与吸光度成正比,对测定牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)及球蛋白(IgG)的表观摩尔吸光系数ε660和桑德尔灵敏度s分别为7.87×105、9.52×105、1.60×106L·mol-1·cm-1和0.083、0.072、0.093μg·cm-2。除阴、阳离子表面活性剂外,其余大部分物质不干扰蛋白质的测定。所拟方法具有简便、快速、选择性好、灵敏度高等特点,应用于尿液、人血清及含乳饮料中总蛋白的测定,结果与考马斯亮蓝G250法基本一致。
2)固绿FCF分光光度法测替米沙坦的含量。
在pH6.2的Britton-Robinson缓冲介质中,替米沙坦(TMST)与生物染色剂固绿FCF(FGF)反应,形成离子缔合物,溶液颜色发生明显改变,最大正、负吸收波长分别位于598、632nm,从而建立光度法测定替米沙坦。在598、632nm处,替米沙坦分别在0~1.35×10-5mol/L、0~1.05×10-5mol/L范围内遵从比尔定律,表观摩尔吸光系数分别为7.65×104L.mol-1.cm-1、1.70×105L.mol-1.cm-1,检出限分别为8.22×10-7mol/L和3.20×10-7mol/L。该方法可用于临床用药、血样及尿样中替米沙坦的测定。
[1]固绿FCF分光光度法测定血清蛋白质
[2]固绿FCF分光光度法测替米沙坦的含量