219861-53-7 / (R)-草酸西酞普兰的含量测定

背景及概述^[1]

西酞普兰草酸盐（CIT）是一种选择性的5-羟色胺再摄抑制剂，它具有耐受性好、不良反应少的特点，被推荐为长期治疗抑郁症的首选药物，1998年美国FDA批准在美国上市，1999年在中国市场销售。CIT为消旋体，其S-对映体选择性抑制5-羟色胺再吸收，而R-对映体(R)-草酸西酞普兰作用甚微。

仪器及试药^[1]

美国Agilent Hypersil 1010型HPLC仪，DVD检测器。 S-CIT对照品及样品均由广州佐森生物科技有限公司提供。S-CIT对照品由S-CIT精制而成［批号:20030108］，R型异构体 <4.0%，有关物质<0.5%，含量测定用归一法，按干燥品计算，含C20H21FN2O·C2H2O4不得少于99.5%。甲醇，乙腈为色谱纯，冰醋酸和三乙胺为分析纯，水为去离子水经蒸馏后使用。

方法与结果^[1]

1、色谱条件

色谱柱：用Chirobiotic V手性柱（250mm*4.6mm，5μm），以甲醇-乙酸-三乙胺（100:0.1:0.1）为流动相；检测波长为240nm，色谱柱温为20℃，流速为1.0mL·min^-1。S和R型异构体之间的分离度大于1.5，R型异构体和S型异构体的保留时间分别约为14.3min和15.5min。

2、线性关系考察

精密称取S-CIT对照品适量，用流动相溶解，并稀释制成每1mL中含1mg的溶液作为贮备液，分别精密吸取贮备液置10mL量瓶中，制成浓度10，25，50，100，150μg·mL^-1的溶液。取上述各溶液20μL进样，记录各主成分峰的峰面积，以平均峰面积（A）为纵座标，以浓度（C,μg·mL^-1）为横座标进行线性回归，回归方程为A=49224.78C-55.066（r=0.9991,n=5）。测定结果表明，S-CIT在10~150μg·mL^-1内，峰面积与浓度呈良好的线性关系，且S型与R型异构体的分离度>1.5。

3、精密度试验

精密量取线性范围试验项下的25，50，100μg·mL^-1浓度，按上述色谱条件重复进样5次，记录各组分的峰面积，求出各组分峰面积的RSD，测定结果表明，S-CIT的RSD为1.0%<2.0%。

4、回收率考察

精密量取S-CIT储备液，加流动相分别定量稀释成每1mL中含S-CIT 25，50，100μg·mL^-1的溶液各5份，按标准曲线项下的色谱条件进样20mL，计算回收率。测定结果表明，S-CIT的平均回收率分别为99.32，99.27%，99.87%，RSD在0.8%~2.6%的范围内。

5、检测限

用流动相配制5μg·mL^-1的S-CIT对照品溶液，进样量6μL,，检测限为0.03μg（10倍信噪比）。

6、样品测定

取S-CIT约10mg，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成100μg·mL^-1的溶液；取20μL注入液相色谱仪，记录色谱图。并按归一法计算供试品中R型异构体和S型异构体含量之比，结果R型异构体均在5%以下，且分离度大于1.5。结果见表1。

参考文献

[1]杨雪梅,刘旭,严轶琛,徐江平.S-西酞普兰草酸盐含量测定[J].中国新药杂志,2004(11):1020-1021.