214217-86-4 / 2-羟基阿托伐他汀的含量检测

背景及概述^[1]

阿托伐他汀为他汀类血脂调节药，属HMG-CoA还原酶抑制剂前体。口服吸收后的水解产物在体内竞争性地抑制胆固醇合成过程中的限速酶，使胆固醇的合成减少，低密度脂蛋白受体合成增加，使血胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平降低，中度降低血清甘油三酯水平和增高血高密度脂蛋白水平。适用于治疗高胆固醇血症和混合型高脂血症，可用于冠心病和脑中风的防治。2-羟基阿托伐他汀为阿托伐他汀的代谢产物。阿托伐他汀在人体内主要由细胞色素P450酶代谢为2-羟基阿托伐他汀(ortho-hydroxyatorvastatin，o-OAT)和4-羟基阿托伐他汀(para-hydroxyatorvastatin，p-OAT)。2-羟基阿托伐他汀和p-OAT占总体抑制活性的70％。同其他他汀类化合物一样，阿托伐他汀、2-羟基阿托伐他汀和p-阿托伐他汀结构中含有羟基羧酸结构，无论在体内和体外均能脱水关环形成内酯，并且，该体内内酯代谢物在体外也易于水解转化为羟基羧酸，因而，羟基羧酸浓度测定易受影响不准确。

含量检测^[2]

检测人血浆中阿托伐他汀及代谢物的液相色谱-串联质谱方法，含下述步骤：预处理，取血浆，加入阿托伐他汀及代谢物同位素内标溶液，以6M醋酸铵水溶液和乙腈为盐析分层试剂沉淀蛋白，涡流及离心后制得血浆样品；色谱，将血浆样品液相色谱分离，采用KinetexXBC18柱，梯度洗脱，流动相A:流动相B初始体积比为60:40，流速0.8mL/min，柱温40℃，流动相A为水，流动相B为乙腈；质谱，电喷雾电离源，正离子多反应监测(+MRM)扫描，喷雾电压5500V，内源气体1(N2)65psi，气体2(N2)75psi，气帘气体(N2)35psi，离子源温度500℃，阿托伐他汀反应监测离子[M+H]+m/z559→m/z440，CE22eV，D5-阿托伐他汀反应监测离子[M+H]+m/z564→m/z445，CE22eV，2-羟基阿托伐他汀和4-羟基阿托伐他汀反应监测离子[M+H]+m/z575→m/z440，CE34eV，D5-邻羟基阿托伐他汀和D5-对羟基阿托伐他汀反应监测离子[M+H]+m/z580→m/z445，CE34eV；计算，以阿托伐他汀及代谢物浓度为横坐标，阿托伐他汀及代谢物与阿托伐他汀及代谢物内标物的峰面积比为纵坐标，回归制得相应标准曲线方程，计算阿托伐他汀及代谢物的血药浓度。

主要参考资料

[1] 常用新药精汇手册

[2] CN201710281072.1检测人血浆中阿托伐他汀及代谢物的液相色谱?串联质谱方法及临床药动学研究的应用