120-73-0 / 嘌呤的检测方法

背景及概述^[1][2]

嘌呤是一种含氮的杂环化合物。由一个嘧啶环和一个咪唑环并合而成。嘌呤碱都是母体嘌呤的衍生物。各种RNA和DNA分子中都含有相同的两种嘌呤碱，即腺嘌呤和鸟嘌呤。此外，体内还有自由存在的嘌呤碱，例如黄嘌呤、次黄嘌呤、尿酸等。前两者是核酸分解代谢的中间产物，后者是核酸分解代谢的最终产物之一，尿中含量较多。用途：用于有机合成，作新陈代谢研究。

检测方法^[3]

方法一、食物中鸟嘌呤和腺嘌呤的检测方法，包括以下步骤：

一、仪器和溶液配制：

1、仪器：液相色谱仪(配紫外检测器)：Agilent1260LC；水浴锅：90℃； 旋转蒸发仪；pH计；十万分之一天平

2、溶液的配制

(1)氢氧化钠溶液(0.1mol/L)：准确称量0.4g氢氧化钠用水定容到100mL。

(2)鸟嘌呤标准储备液：称取一定质量的标准品，加入5mL氢氧化钠溶液 溶解，用水定容到100mL，配成500mg/L的标准储备液。

(3)线嘌呤标准储备液：称取一定质量的标准品，加入5mL氢氧化钠溶液 溶解，用水定容到100mL，配成500mg/L的标准储备液。

(4)鸟嘌呤和腺嘌呤混合标准溶液：吸取一定体积的鸟嘌呤和腺嘌呤标准 储备液，配制成100mg/L的混合标准溶液。

(5)乙酸铵溶液(流动相)：准确称取1.54g乙酸铵，用水定容到1L，用 磷酸将pH调至3.0。

(6)三氟乙酸‑甲酸溶液：以体积比1∶1配制三氟乙酸、甲酸的混酸溶液。

方法二、一种基于酶催化的细胞内嘌呤电化学检测方法，它涉及一种细胞内嘌呤碱基的检测方法。本发明要解决采用现有技术无法获得细胞内核苷酸代谢过程中嘌呤单质含量的问题。本发明方法：一、绘制标准曲线：通过电化学检测仪得到电化学信号计算峰面积，绘制每个标准品标准曲线；二、裂解液的二次电化学检测：待检测细胞的裂解液经第一次电化学检测，得到黄嘌呤-鸟嘌呤混合信号峰和腺嘌呤-次黄嘌呤混合信号峰；加入黄嘌呤氧化酶溶液后经第二次电化学检测，得到鸟嘌呤信号峰和腺嘌呤信号峰；三、计算单嘌呤的含量：用加黄嘌呤氧化酶前得到的峰面积减去加黄嘌呤氧化酶后得到的峰面积，结合标准曲线，求出每种嘌呤碱基的含量。本发明用于细胞检测领域。

主要参考资料

[1] 儿科学辞典

[2] 化合物词典

[3] [中国发明] CN201310138043.1 食物中鸟嘌呤和腺嘌呤检测方法