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光黄素为核黄素的分解产物。核黄素营养状况的常用评价方法是测定尿中核黄素含量。尿中核黄素的测定方法有微生物法、高效液相色谱法和荧光法上等，微生物法手续繁琐，仅在早年使用，现已不用。高效液相色谱法不成熟，且需要一定的设备，成本高、速度慢。
目前我国常用硅镁吸附剂净化荧光法，此法测定过程要求避光并尽快完成，操作条件难控制，并且效率低，大批量测定较困难。尿中核黄素大多以游离形式存在，游离核黄素对光极为敏感，碱性条件下光照下即分解产生光黄素，光黄素的三氯甲烷溶液具有较强的荧光发射，在250 nm 内荧光强度是稳定的，且不受光的影响，故可在最佳激发波长450 nm、最大发射波长5 10 n m处测定。
光黄素主要被用作分析试剂。其应用举例如下：
光黄素荧光法测定食品中核黄素，所用的核黄素标准液浓度为100 g/m1，浓度较高以至于核黄素不能完全溶解；有实验所用方法中，核黄素标准贮备液及核黄素标准工作液的配制沿用硅镁吸附剂净化荧光法中核黄素标准液的配制，因其浓度小，核黄素完全溶解。用此方法与硅镁吸附剂净化荧光法测定尿中核黄素含量，结果经两样本资料检验，表明两种方法测定结果无显著性差异。
此方法与硅镁吸附剂净化荧光法比较：
(l) 硅镁吸附剂净化荧光法要求始终在暗室进行，并且热蒸馏水温度应始终控制在50 ℃-60 ℃，操作条件难控制；光黄素荧光法只要求在避光条件下进行。
(2) 硅镁吸附剂净化荧光法中，尿样要硅镁吸附剂，由于尿中杂质干扰，尿样过柱速度不同，个别样品速度很慢，影响整批样品测定进程；光黄素荧光法反应速度是相同的，可以进行整批样品的测定。
(3) 硅镁吸附剂净化荧光法要求试验结束后尽快测定，以免游离核黄素见光分解，造成结果偏差；光黄素荧光法中，光黄素的三氯甲烷溶液最长在25 0min 内荧光强度稳定，而且不受光影响，所以可以在放置时间内进行下一批操作，节省时间。
(4) 硅镁吸附剂净化荧光法每批最多只能测定20 个样品，时间约为3 h，效率低，光黄素荧光法每批测定20 个，可以在照射60min 时和样品处理完放置时进行下一批操作，大大节省时间，平均每批可以在l h 内测完。
本法是由光黄素荧光法测定食品中核黄素改进而来，故在测定尿中核黄素含量时，由于尿液样品保存于酸性环境中，必须对氢氧化钠加入量进行调整，使核黄素光解完全。
食品中天然存在的维生素B2 一般呈结合形式，与磷酸和蛋白等结合成复合化合物。此种结合型维生素B2 对光比较稳定。国标法测定维生素B2 即是针对食品中天然存在的维生素B2 而制定的，由于食品成分比较复杂，试样处理繁琐费时。
而保健食品中的维生素B2 大多以游离形式存在，且试样成分相对简单，如采用国标法测定既耗时又费试剂。游离维生素B2 对光极为敏感，光照下即分解产生光黄素。有研究参考日本卫生试验法食品中维生素B2 的测定方法，利用维生素B2 分解为光黄素这一反应，以光黄素荧光法定量测定保健食品中的维生素B2 含量，方法简便、快速，且准确度及精密度都能满足分析要求。
光黄素测定方法：取光黄素对照品10 mg，精密称定，置100 mL量瓶中，加入水约50 mL及冰醋酸1 mL后超声(功率120 W，频率40 kHz)处理5min，置70 ℃水浴至溶解，冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，精密移取1 mL置100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得光黄素对照品溶液；精密称取各批样品适量，同法制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得供试品溶液。精密量取光黄素对照品溶液20 μL注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约达满量程的20%；再准确量取光黄素对照品溶液和供试品溶液各20 μL注入液相色谱，记录色谱图至主峰保留时间的2倍。
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