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替泊沙林是一种同时具有抑制5-脂氧合酶和环氧合酶作用的有效抑制剂，具有抗炎、治疗多种疼痛(手术后、关节)及自身免疫性疾病等多种药物活性。传统方法中替泊沙林的合成第一步多采用异丙基氨化锂、二异丙基氨化镁或双(三甲基甲硅烷基)氨化锂等极易燃烧、危险性很大的碱作为催化剂，并且要求低温(−78℃)、无水、无氧，反应条件苛刻，因此，找到一种反应条件温和、产率较高的合成替泊沙林的新方法具有重要意义。
1）替泊沙林的镇痛活性
由小鼠的扭体反应试验可以看出，替泊沙林可明显抑制小鼠因腹腔注射冰醋酸而出现的扭体反应。灌服给药后，该化合物显著延缓小鼠首次出现扭体反应的时间及减少1h内的扭体次数。CMC对照组、双氯酚酸钠组、替泊沙林1.12、2.24及4.48mg·kg−3试药组的扭体反应潜伏期分别为3.7、13.0、11.5、12.6和15.1min；与上述组别相对应的1h内小鼠的扭体次数分别为139.0、54.9、73.4、46.8及31.4次。方差分析结果表明：替泊沙林给药组和CMC对照组间扭体反应潜伏期及1h内小鼠的扭体次数均有显著性差异(P<0.05)，且替泊沙林可剂量依赖性地延长注射冰醋酸后的扭体反应潜伏期并减少1h内小鼠的扭体次数，替泊沙林对扭体反应的潜伏期及1h内扭体次数的抑制作用和双氯酚酸钠无显著性差异
2）替泊沙林对人结肠癌的抑制作用10只裸鼠皮下接种HT-29人结肠癌细胞建立人结肠癌模型，随机分为治疗组和对照组。治疗组以替泊沙林与5%羧甲基纤维素钠溶液制成的混悬液给药，对照组不作任何治疗。治疗期间观察裸鼠皮下瘤体的生长情况，测算肿瘤体积。治疗结束后处死裸鼠并取瘤，测量肿瘤质量，检测环氧合酶-2/5-脂氧合酶在肿瘤组织中的表达，用免疫组化方法检测肿瘤微血管密度，用脱氧核糖核苷酸末端转移法酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测肿瘤细胞凋亡情况。结果10只裸鼠全部成瘤，实验过程中无裸鼠死亡。实验结果显示：替泊沙林可抑制HT-29人结肠癌细胞的生长，可降低环氧合酶-2/5-脂氧合酶在人结肠癌细胞所致肿瘤组织中的表达水平，对诱导人结肠癌细胞诱导的裸鼠皮下移植瘤具有促进肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤微血管生成作用。结论环氧合酶-2/5-脂氧合酶双重抑制剂替泊沙林可能通过促进结肠癌细胞的凋亡、抑制肿瘤微血管生成，从而抑制结肠肿瘤的生长。
1）4-氯-γ，ε-二氧代-苯己酸(1)的合成
将叔丁醇钾(22.10g，0.20mol)用210mL无水四氢呋喃溶解，制成溶液。在温度−15～10℃，将对氯苯乙酮(13.40g，0.09mol)溶于30mL四氢呋喃中，在40min内用恒压漏斗将其滴加到叔丁醇钾的四氢呋喃溶液中，滴完后反应0.5h。琥珀酸酐(10.51g，0.11mol)溶于170mL四氢呋喃中配成溶液，在温度−15～10℃下，滴加到上述反应液中，3.5h内滴完。继续反应2h。室温下，用稀盐酸(40mL)(浓盐酸∶水=1∶7，体积比)将反应液的pH值调至4～5。将反应液抽滤，滤饼用少量二氯甲烷或者四氢呋喃冲洗，所得滤液减压蒸去溶剂，得到黄色棉絮状物质。依次用乙酸乙酯和水冲洗，得白色固体1(12.40g，0.05mol)，收率：56%。mp137～139℃。MS：m/z=277[M+Na]+。1HNMR(CDCl3)δ：2.76～2.83(m，4H，2-CH2，3-CH2)，6.16(s，1H，5-CH2)，7.42～7.44(d，2H，J=7Hz，Ph-H)，
7.78～7.81(d，2H，J=7Hz，Ph-H)，15.70(s，1H，OH)。
2）5-(4-氯-苯基)-1-(4-甲氧基-苯基)-1H-吡唑-3-丙酸(2)的合成
用甲醇作溶剂合成2将1mL干燥的三乙胺和40mL无水甲醇加入到100mL的烧瓶中，室温下搅拌5min，然后加入对甲氧基苯肼盐酸盐(0.83g，4.75mmol)，继续搅拌1h后，加入1(1.02g，4.00mmol)，继续反应7h，停止反应。将反应液抽滤，滤液蒸干，得粗品。将粗品溶解到30mL二氯甲烷中，加入20mL水，用分液漏斗分出二氯甲烷，并用二氯甲烷(15mL×3)萃取水相，合并二氯甲烷，用无水硫酸钠干燥过夜。干燥后过滤，滤液蒸干，用乙酸乙酯重结晶，得纯品2(0.99g，1.67mmol)，产率70%。mp125～127℃。MS：m/z=357[M+H]+。1HNMR(CDCl3)δ：2.80～3.08(m，4H，2×CH2)，3.81(s，3H，CH3O)，6.33(s，1H，4-CH)，6.84～6.86(m，2H，Ph-H)，7.11～7.27(m，6H，Ph-H)。
3）5-(4-氯苯)-N-羟基-1-(4-甲氧基苯)-N-甲基-1H-吡唑-3-丙酰胺(替泊沙林)(3)的合成
以二氯甲烷作溶剂合成3将2(6.40g，17.90mmol)用无水二氯甲烷(202mL)溶解，配成溶液备用。将草酰氯(4.08g，32.14mmol)溶于无水二氯甲烷(200mL)，配成溶液，在冰浴冷却下用恒压漏斗慢慢滴加到上述2的二氯甲烷溶液中，2h内加完，加完后撤掉冰浴，继续在室温下反应3.5h，停止反应。将反应液在无水条件下蒸干，所得固体物加无水二氯甲烷(100mL)溶解，备用。将N-甲基羟胺盐酸盐(2.67g，31.97mmol)、三乙胺(8.85g，87.70mmol)溶于无水二氯甲烷(200mL)配成溶液，在冰浴冷却下滴加到上述备用液中，4.5h内滴完，继续室温反应14h。反应结束后向反应液内加入蒸馏水200mL，用分液漏斗分出二氯甲烷，二氯甲烷依次用5%稀盐酸(200mL×2)、饱和食盐水(200mL×1)洗涤，最后用无水硫酸钠干燥过夜。干燥后滤去硫酸钠，减压蒸去二氯甲烷，得粗品3。粗品用快速色谱柱纯化(洗脱液：乙酸乙酯∶石油醚∶三乙胺=20∶20∶1(体积比))，得纯品3(3.50g，9.09mmol，产率50%)，mp124～126℃。HR-ESI-MSCalcd.(Found)[C20H20ClN3O3+H]+：386.1302(386.1271)。1HNMR(CDCl3)δ：2.94～3.22(m，4H，2×CH2)，3.17(s，3H，NCH3)，3.84(s，3H，CH3O)，6.32(s，1H，4-CH)，6.87～7.28(m，Ph-H，8H)，10.80(brs，1H，N-OH)。
[1] 替泊沙林的新合成方法及其镇痛活性的研究
[2] 替泊沙林对裸鼠结肠癌移植瘤的抑制作用
[3] CN200710053988.85-(4-氯-苯基)-N-羟基-1-(4-甲氧基-苯基)-N-甲基-1H-吡唑-3-丙酰胺的合成新方法及药物用途