手机扫码访问本站
微信咨询
野菊花(FlowerofIndianDendranthema,Wild chrysanthemum)为菊科多年生草本植物野菊的头状花序,外形与菊花相似。产品以色黄无梗、完整、气香、花未全开者为佳。野菊花可广泛用于治疗疔疮痈肿、咽喉肿痛、风火赤眼、头痛眩晕等病证。同时又有很好的降压作用,可用于高血压病的辅助治疗。
蒙花苷是野菊花的特征性化学成分,也是野菊花中活性最高的黄酮类成分,分子式为C28H32O14,分子量为592.54,属于Flavonoids黄酮类,基于蒙花苷是野菊花的特征性化学成分,因此,如果能以蒙花苷作为该药材及其相关制剂的质量评价指标,既能较真实地反映其质量又具有专属性,可对野菊花药材及其制剂的质量控制起到重要作用。
目前有关于野菊花中蒙花苷提取方法主要涉及回流提取法、碱提醇沉法等方法,纯化方法主要涉及高效制备液相色谱法、大孔吸附树脂等方法。例如一种从野菊花中分离得到蒙花苷单体的方法,具体实验方案为:将野菊花药材用乙醇溶液回流提取,收集滤液,将滤液浓缩后静置析晶并烘干沉淀,将沉淀以甲醇进行超声波洗涤,过滤,收集过滤固体,烘干,经烘干后的固体中,加入有机溶剂溶解,过滤,收集滤液,经高效制备液相色谱分离,针对性收集蒙花苷单体的制备馏分溶液,得蒙花苷单体溶液,蒙花苷单体析出后经干燥得到蒙花苷单体产品。
该方法需经制备液相色谱分离,操作复杂,成本较高,很难进行大量制备。还有研究提供了一种从野菊花中分离得到蒙花苷单体的方法,该方法工艺复杂,需要加入酸碱,容易破坏化合物结构,需经大孔吸附树脂,费时费溶剂,且结晶收率低。就现有技术而言,还需对从野菊花中提取分离蒙花苷工艺进行改进,才能很好地满足实际生产需求。
蒙花苷,其英文名为Linarin,属于黄酮类化合物。蒙花苷具有抗金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌、抗衰老作用、抗缺氧作用、抗不良刺激作用、对机体双向调节作用、抗疲劳作用、抑制血糖升高作用、毒性及致突变性致畸方面的研究、对学习记忆影响作用。
蒙花苷具有非常广泛的生理和药理活性,对预防糖尿病和改善糖尿病有显著的作用还具有抑制磷酸二酯酶、醛糖还原酶、金黄色葡萄球菌、乙型溶血链球菌、抗菌等作用,能保护肝脏,并对慢性气管炎有一定疗效。如蒙花苷能降低高血糖小鼠血糖,同时可改善糖尿病小鼠的糖耐量、降低糖尿病小鼠血清丙二醛、总胆固醇及甘油三酯的含量,且无毒副作用,因此蒙花苷可用于糖尿病、高血脂相关的药物、食品或食品及药物组合物。
此外还可以利用蒙花苷制备其他化合物,如酶法水解蒙花苷制备金合欢素,金合欢素是野菊花中一种高活性的苷元成分,在野菊花中含量非常低,绝大部分都以其糖苷形式存在,故从植物中直接抽提并不是有利的工业制备方法。蒙花苷是金合欢素的二糖苷,在野菊花、菊花、密蒙花等中草药中含量较高,两者区别在于金合欢素的C-7位上连接了一分子6-脱氧-α-L-吡喃鼠李糖基-(1 →6)-β-D-葡萄吡喃糖。
尽管目前通过水解蒙花苷制备金合欢素的案例较少,但是这也可能成为一种制备金合欢素的有效途径。方法包括制备粗酶液、酶解和纯化步骤,具体为:1)粗酶液的制备:将纤维化纤维细菌接种于液体培养基中,30℃培养40h,9000g离心10min后取上清,进行硫酸铵沉淀,收集20%-40%的组分,用缓冲液重新溶解即得;2)酶解:以蒙花苷为原料,利用溶解后的粗酶液对其转化,使7位的β-D- 葡萄糖苷键被水解得到金合欢素.
具体方法为:取蒙花苷置于反应瓶中,按照10:1:2:0.1的体积比加入缓冲液、助溶剂、粗酶液与激活剂后共孵育;反应体系中蒙花苷浓度为0.1-0.5mM,缓冲液为20-50mM,助溶剂的浓度为2-10 mM,酶量为5-10mg/ml,激活剂浓度为2-20mM,pH值为5.0-11.0,反应温度为20-40℃,反应时间为1-6h;3)金合欢素的制备:待反应结束后,将上述转化液与2倍体积的甲醇混合,加热至60度重复提取3-5次,收集提取液冷却结晶即得到金合欢素。
方法1:一种从野菊花中提取蒙花苷的方法,包括以下步骤:步骤1:将野菊花粉碎并过三号筛后与硅藻土混合,野菊花和硅藻土的重量比为1:1;步骤2:采用ASE萃取法萃取蒙花苷,收集萃取液,其中,ASE萃取法所采用的萃取溶剂为甲醇.
步骤2包括以下子步骤:S1:在萃取池的底部垫3-6张滤纸,再加入硅藻土作为底层;S2:向萃取池中加入步骤1所得到的野菊花和硅藻土的混合物;S3:向萃取池中加入适量的硅藻土作为表层;S4:采用甲醇进行萃取;其中,萃取参数为:萃取温度100℃;循环次数2次;静态萃取时间10min;冲洗体积100%;吹扫时间60s;步骤3:将萃取液进行离心分离得到含有蒙花苷的上清液。
方法2:一种蒙花苷单体的分离纯化方法,包括如下工艺步骤:
1)提取:将野菊花药材粉碎成直径3mm的粗粉,按照药材重量:乙醇溶液体积=1Kg:10L计算,加入体积百分比为95%的乙醇溶液,回流提取3~4次,每次2小时,过滤,收集、合并滤液;经乙醇回流提取得到的提取液即滤液中主要含有蒙花苷、色素和极性类杂质成分。
2)浓缩:将步骤(1)收集、合并的滤液回收乙醇,浓缩至原滤液体积的10%,常温下静置析晶10~12小时,过滤收集沉淀,除去滤液,将沉淀60℃烘干后进行下一步洗涤处理;经浓缩后的滤液中主要含有色素和大分子极性类杂质成分。
3)溶剂洗涤:向步骤(2)经烘干后的沉淀中加入10倍量体积的甲醇进行超声波洗涤,待产品与甲醇成混悬液后用中速滤纸过滤,收集过滤固体,60℃烘干后待下一步处理;经洗涤后的滤液层主要含有色素和小极性类杂质。
4)溶解、过滤:将步骤(3)经烘干后的固体中,按照固体物质量:溶剂体积=1g:10mL,加入有机溶剂溶解,溶解后的溶液用有机膜过滤,滤除颗粒杂质,收集滤液;所述有机溶剂为吡啶、四氢呋喃或DMF。
5)高效制备液相色谱分离:取步骤(4)所得的滤液进样,用反相高效液相色谱法(RP HPLC)制备分离蒙花苷单体,紫外检测器在线监测,针对性收集蒙花苷单体的制备馏分溶液,得蒙花苷单体溶液;
[1] CN201510029603.9一种从野菊花中提取分离蒙花苷工艺
[2] 柴红玲, 吴林森, 金晓春. 野菊花天然活性成分蒙花苷的提取[J]. 湖北农业科学, 2011, 50(8): 1663-1665.
[3] CN201510029603.9一种从野菊花中提取分离蒙花苷工艺
[4] CN201610989095.3蒙花苷的医药保健用途
[5] CN201510451784.4一种酶法水解蒙花苷制备金合欢素的方法
[6]CN201510243008.5从野菊花中提取蒙花苷的方法
[7] CN201210577503.6一种蒙花苷单体的分离纯化方法