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茶黄素(theaflavins,TFs)是在红茶发酵过程中茶多酚物质氧化形成的主要色素 物质,其中茶黄素、其中茶黄素(TF1)、茶黄素-3-没食子酸酯(TF2A)、茶黄素-3'-没食子酸 酯(TF2B)和茶黄素-3,3'-双没食子酸酯(TF3)是4种最主要的茶黄素。茶黄素不仅是红茶滋 味和汤色最重要的影响因子,而且具有治疗心血管系统疾病、抗炎、抗氧化、抗病毒、增强免 疫力、降血糖、抗肿瘤等多种药理功效,是一类极具开发潜力的产物。
(1)选用英红九号红茶为原料,粉碎后过60目筛,按固液比(w/v)为1:10加入50% 的乙醇溶液,回流提取3次,合并提取液并旋转浓缩至无乙醇;
(2)采用乙酸乙酯对红茶浓缩提取液进行萃取,红茶浓缩提取液和乙酸乙酯的体 积比为1:1,萃取次数为3次,合并乙酸乙酯萃取液并旋转浓缩除去乙酸乙酯,冷冻干燥得到 乙酸乙酯层提取物;
(3)取乙酸乙酯层提取物用80%甲醇溶液(用乙酸调节pH值为3.5)溶解,通过MCl 反相色谱填料短柱脱除叶绿素后用80%甲醇溶液(pH值为3.5)洗脱至无红色,收集洗脱液 并浓缩干燥得到脱色茶黄素粗品;
(4)取脱色茶黄素粗品,甲醇溶解样品后,采用干法拌硅胶,装硅胶柱后,以乙酸乙 酯(含2%乙酸)进行洗脱,通过液相色谱检测收集茶黄素段的洗脱液,收集合并洗脱液并浓 缩干燥得到茶黄素粗品;
(5)取茶黄素粗品,用40%甲醇溶液(含0.1%乙酸)溶解样品后,采用MCl反相色谱 柱以40%甲醇溶液(含0.1%乙酸)洗脱除去前杂,再用60%甲醇溶液(含0.1%乙酸)洗脱, 收集茶黄素段的洗脱液,合并茶黄素段洗脱液并浓缩干燥得到纯化茶黄素;
(6)取纯化过的茶黄素样品用30%甲醇溶液(含0.1%乙酸)溶解样品后,采用C18 反相色谱柱,以30%甲醇溶液(含0.1%乙酸)进行洗脱,除去前杂,再用50%甲醇溶液(含 0.1%乙酸)进行洗脱,收集茶黄素段的洗脱液,合并茶黄素段洗脱液,合并茶黄素段洗脱液 并浓缩干燥得到高纯度英红九号红茶茶黄素。
(1)按提取茶多酚的工艺制备得到700kg富含80mg/ml茶多酚的乙酸乙酯溶液;
(2)将700kg富含茶多酚的乙酸乙酯溶液和800kg粉碎的茶鲜叶投入氧化发酵罐内,依次加入20L乙酸乙酯和1.5L的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲剂,在常温状态下,通入空气搅拌氧化发酵30-40分钟,得茶黄素酯相溶液;
(3)茶黄素酯相溶液先经过滤除去茶渣,再进行浓缩后用碳酸氢钠溶液洗杂,洗杂后得到水相溶液和酯相溶液;茶渣烘干,另存备用。
(4)步骤(3)的水相溶液浓缩后喷雾干燥,得到低规格的茶黄素干粉;
(5)步骤(3)的酯相溶液浓缩以回收乙酸乙酯,然后加入水使茶黄素转溶到水中;
(6)转溶后的茶黄素水溶液进行离心过滤,除去固态杂质,得到纯净的茶黄素溶液;
(7)将茶黄素溶液浓缩到固含量20-30%,然后喷雾干燥即得到高规格的茶黄素干粉产品。
经检测计算,茶黄素干粉产品的纯度为55.6%,收率为54%(以茶多酚计)。
[1] [中国发明,中国发明授权] CN201610574681.1 一种从红茶中提取茶黄素的方法
[2] [中国发明,中国发明授权] CN200910153520.5 一种茶黄素的产业化制备方法