3184-13-2 / L-鸟氨酸盐酸盐的制备方法

概述^[1]

L-鸟氨酸盐酸盐是重要的医药工业基础原料，是细胞中重要的代谢产物，对于生物体内液态氨的排除有重要的调节作用。

生产方法^[1]

目前，国内外对于酶法转化生产L-鸟氨酸盐酸盐的文献报道不一。L-鸟氨酸盐酸盐的制备方法主要有三种：化学法、发酵法和酶法。

1化学法

目前工业上最常用的生产方法是采用化学法水解L-精氨酸制备L-鸟氨酸，1966年Shell Int.Rearsch采用丙烯酸和氰化钠作为主要原料化学合成L-鸟氨酸。

2发酵法

用肠杆菌中的某些菌如Escherichia coli，Aerobacter aerogenes，Proteus rettgeri和Proteus mirabili的突变菌株，进行发酵生产L-鸟氨酸，发酵液中L-鸟氨酸最高为15mg/mL，Shibuya等利用Arthrobacter citreus 23-2A的突变株发酵生产L-鸟氨酸，发酵72h，产率为35.2g/L。

3酶法

沈淑英等用粪链球菌ATCC8043，粪产碱杆菌ATCC21400，粪链球菌S-43游离细胞转化底物L-精氨酸制备L-鸟氨酸，转化率为95-100％，提取收率为85-90％(天津微生物，1981，3：28-38)。1995年，M Kyriakos等利用从动物肝脏中提取的精氨酸酶水解L-精氨酸用于多种L-鸟氨酸盐的制备。

上述L-鸟氨酸酶法生产过程都是利用游离细胞转化底物L-精氨酸，所以转化液中会含有少量菌体蛋白和其他杂质，不利于产物的分离纯化；且转化后要去除菌体，降低产物得率，导致生产成本增加。

制备方法^[2]

一种酶转化生产L-鸟氨酸盐酸盐的方法，其特征在于操作简单、精氨酸转化率高、产量高，该方法包括如下步骤：

(1)固定化酶的制备

取三乙醇胺阴离子苯乙烯树脂，用碳酸钾溶液浸泡6-18h后过滤，再将滤出的三乙醇胺阴离子苯乙烯树脂与碳酸钾、溴化氢按质量比为1∶(0.1-0.6)∶(0.2-0.5)配制成反应溶液，于冰浴中反应5-60min，调节pH值至7-10，再加入精氨酸酶，使其与三乙醇胺阴离子苯乙烯树脂的质量比为(0.002-0.01)∶1，于1-10℃反应12-48h，洗涤后用饱和食盐水浸泡0.5-3h，再洗净即制得固定化酶，保存于水中；

(2)转化条件的优化

将步骤(1)中制得的固定化酶与精氨酸、乙酸锰按质量比1∶(1-3)∶(0.004-0.02)混合，溶于去离子水中，调节pH值至6-9，在30-50℃下，搅拌反应得到混合液；

(3)产物提取和精制

将步骤(2)中的混合液过滤后，向滤液中加入活性炭，用盐酸调节pH值至3-6，于40-90℃下搅拌反应5-30min后，过滤，将滤出液浓缩至有结晶析出，停止浓缩，加入醇类，搅拌0.5-3h，析出L-鸟氨酸盐酸盐，过滤、干燥即得产品。

参考资料

[1]苏建勇, 郑南华, 张建宇. 一种固定化酶法生产l-鸟氨酸盐酸盐的方法:.

[2]刘爱福. L-鸟氨酸盐酸盐的制备方法:.