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酶联免疫吸附实验的5大关键注意事项,别忽视第3条!

  千里之堤,溃于蚁穴。ELISA实验操作虽简便,但处处都是细节。从样品准备,到试剂回温,从孵育到洗涤。纪宁生物带大家一起来了解下注意事项


  1.样品准备

  常见的ELISA样本有血清和血清、细胞培养上青、组织匀浆等等。避免使用严重溶血的血清样品进行实验,样品在实验前需要充分混匀。

  2.试剂盒回温

  确保桌面温度在18-16℃。将试剂去除放置在桌面,避免回温不充分。注意稀释所用双蒸水也须恢复至室温。为避免试剂失效,请勿在恒温箱等高温环境下回温。
纪宁ELISA试剂盒

  3.移液

  安装吸头。单通道移液器安装吸头时左右选择拧紧,多通道移液器安装吸头时需前后按压上紧。请勿上下振动,以免破坏移液器内部结构。吸取样品时,将移液器按至底部二挡,洗液后按至一档排出。注意吸头应位于反应孔上方1/3处贴壁放液,请勿伸到反应孔底部,避免破坏包被结构。移液器切斜角度请勿超过45°注意在取样品时,吸头深入液面下1-2mm吸液,避免沾到多余液体。在液面下放液,吹打混匀,注意避免起气泡。吸取洗涤液时,将移液器按至1档洗液后,按至一档,在反应孔上方悬空放液避免产生气泡。实验过程中若剩余大量试剂,请回收至干净的离心管,并做好标记,为避免污染,请勿倒回原试剂瓶。


移液器

  4.孵育

  在说明书要求温度下进行孵育,实验前请检查仪器温度,孵育过程中要注意受热均匀,请勿叠放反应板。

  5.洗涤

  去除孔内液体时垂直甩板,请勿切斜甩板,以免造成交叉污染。为避免影响读数,请勿用手指接触包被板底部。最后一次洗涤后,在吸水纸上完全拍干,直至无水渍残留,也可以选用卷纸进行拍干,避免使用碎屑较多的草纸

  
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