纪宁生物果胶甲酯化程度测剂盒测定意义

纪宁生物果胶甲酯化程度测剂盒测定意义

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分，除了起结构支撑、物质运输等作用外，还具有抵抗逆境的作用。果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。

测定原理：

果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇，甲醇与 2,4-戊二酮反应显色，在 412nm 下测定吸光值；同时半乳糖醛酸在70℃下与浓硫酸反应生成 5-甲酰基-2-呋喃甲酸，5-甲酰基-2-呋喃甲酸与 3,5-二甲基苯酚反应产生有色物质，在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。

自备实验用品及仪器：

天平、低温离心机、酶标仪、96 孔板、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。

测定意义：

测定原理：

果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇，甲醇与 2,4-戊二酮反应显色，在 412nm 下测定吸光值；同时半乳糖醛酸在 70℃下与浓硫酸反应生成 5-甲酰基-2-呋喃甲酸，5-甲酰基-2-呋喃甲酸与 3,5-二甲基苯酚反应产生有色物质，在 450nm 下有最大吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。

自备实验用品及仪器：

天平、低温离心机、酶标仪、96 孔板、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。

计算公式

1.甲醇生成量计算

标曲为 y = 0.0298x + 0.009，R2 = 0.9997；x 为标准品浓度，μmol/mL；y 为吸光值△A1。甲醇生成量（μmol/g鲜重）=（ΔA1-0.009） ÷0.0298÷W×V 样总

=33.56×（ΔA1-0.009）÷W

2.半乳糖醛酸含量计算

标准曲线为 y = 0.2585x - 0.1746，R2 = 0.9986；x 为标准品浓度，μmol/mL；y 为吸光值△A2。半乳糖醛酸（μmol/g 鲜重）=(ΔA2+0.1746) ÷0.2585÷W×V 样总

=3.87×(ΔA2+0.1746)÷W

果胶甲酯化程度（%）=甲醇生成量÷半乳糖醛酸含量×100% V 样总：加入提取液体积，1mL；W，样本质量，g。

上海纪宁生物一直致力于为广大高校、科研院所和企事业单位提供的果胶甲酯化程度测剂盒科研试剂和完善的技术服务，满足生物化学、分子生物学、细胞生物学、免疫学等生物科技实验需求。

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