细胞培养：设备与试剂详解

  细胞是大多数生物体的结构和功能的基本单位。细胞培养是指在体外模拟体内环境，使细胞在人工环境下控制的条件下生长和繁殖的技术。细胞培养的目的一方面进行后续的下游实验，例如：

•   WB、ELISA等蛋白检测
•   DNA、RNA等分子检测
•   凋亡、增殖、周期等功能检测
•   原代细胞培养、冻存等细胞实验

  另一方面来说进行更深层次的生命科学研究，并将其应用于解决实际问题，例如疾病治疗、药物开发、环境保护等。

  细胞培养是细胞生物学实验的基础，细胞养好了，后续实验才能顺利进行，才能得到可靠的实验结果。今天，本文为大家介绍一下细胞培养的相关设备和试剂。

  细胞培养相关设备

  在实验室进行细胞培养，我们会用到超净工作台和生物安全柜。如果处理的样品对人体无害，且操作过程不会产生气溶胶，可以使用超净工作台；如果处理的样品对人体有潜在危害，或操作过程可能产生气溶胶，则必须使用生物安全柜。

  图1超净工作台和生物安全柜（图片来源网络，如侵权请联系）

  超净工作台/生物安全柜的工作流程：

  其它细胞培养设备包括：

  细胞培养相关试剂

  1.细胞培养基

  培养基从生物体内取出细胞或者组织，将放入有利于其生存/或增值人工环境中进行培养物培养的介质，培养基培养基的作用是为细胞培养提供生长必须的营养物质。培养基分为完全培养基和不完全培养基。

  完全培养基：包含支持细胞生长所需的全部成分，即基础培养基、血清、抗生素等都已添加齐全，可以直接用于细胞培养。这也是实验室中最常用的培养基类型。

  不完全培养基：通常只包含基础培养基和抗生素，不含血清或其他特殊添加剂。这类培养基通常用作配制完全培养基的基础，或者在一些特殊实验中使用，例如需要研究特定生长因子对细胞影响的实验。

  具体细胞培养基的选择要结合细胞种类和培养条件选择，如果你不清楚细胞如何选择培养基，也欢迎咨询纪宁生物，我们可以帮您推荐优质的培养基。

  血清

  血清为细胞培养提供细胞生长因子和激素，促进细胞增殖、分化和存活。血清中的蛋白质可以缓冲pH值的变化，并保护细胞免受机械损伤和毒性物质的伤害。市面上细胞培养用的较多是胎牛血清，胎牛血清对细胞的有害成分较少。除此之外，新生牛血清，营养成分次于胎牛血清，价格相对较低。值得注意是血清成分复杂，批次间差异较大，可能会影响实验结果的稳定性。如果您对使用血清有疑惑，不知道选择哪种血清，欢迎咨询纪宁生物，我们帮助您推荐合适的血清应用您的细胞培养。

  胰酶

  胰酶是一种蛋白酶，能够水解蛋白质肽链中的赖氨酸和精氨酸羧基端肽键。细胞之间的连接蛋白，例如细胞外基质中的纤维连接蛋白、细胞-细胞连接蛋白等，都含有这些氨基酸残基。胰酶通过水解这些连接蛋白，从而使细胞彼此分离。

  胰酶在细胞培养中的应用：

  1.细胞传代：当细胞生长到一定密度时，需要进行传代以提供更大的生长空间。

  2.细胞计数：进行细胞计数时，需要先将细胞消化成单个细胞悬液。

  3.细胞冻存：细胞冻存前，通常需要先将细胞消化下来，制成细胞悬液，再加入冻存液进行冻存。

  使用胰酶的注意事项：

  1.浓度和作用时间：胰酶的消化能力较强，使用时需要控制好浓度和作用时间，避免过度消化损伤细胞。

  2.EDTA的作用：胰酶通常与EDTA(乙二胺四乙酸)联用，EDTA可以螯合Ca2+和Mg2+等二价阳离子，这些离子是某些细胞连接蛋白所必需的，因此EDTA可以增强胰酶的消化效果。

  3.终止消化：消化完成后，需要及时加入含有血清的培养基或胰酶抑制剂(例如大豆胰酶抑制剂)来终止胰酶的消化作用，避免细胞受损。

  抗生素

  细胞培养基营养丰富，为细胞生长提供了优渥的条件，但同时也为细菌、真菌等微生物提供了滋生的温床。使用抗生素可以防止细菌、真菌和其他微生物的污染，保护细胞健康生长。常用的细胞培养抗生素：

  1.青霉素(Penicillin):抑制细菌细胞壁合成，对革兰氏阳性菌效果较好。

  2.链霉素(Streptomycin):抑制细菌蛋白质合成，对革兰氏阴性菌效果较好。

  3.青霉素-链霉素双抗(Penicillin-Streptomycin,P/S):两者联合使用，可以扩大抗菌谱，是细胞培养中最常用的抗生素组合。

  4.庆大霉素(Gentamicin):广谱抗生素，对多种革兰氏阳性和阴性菌有效。

  5.两性霉素B(AmphotericinB):抗真菌药物，作用于真菌细胞膜上的麦角甾醇。

  上述是细胞培养相关设备和试剂介绍，充分了解细胞培养设备和试剂的作用，才能在细胞实验的舞台上“运筹帷幄”，让细胞乖乖听话！