小鼠elisa检测试剂盒​操作步骤

  

  白脂素（Asprosin）是哺乳动物（白色脂肪）组织中产生的一种蛋白质激素，可刺激肝脏将葡萄糖释放到血液中。白脂素由基因FBN1编码，作为原纤维蛋白原的一部分，并通过异性蛋白水解作用从原纤维蛋白的C末端释放。在肝脏中，白脂素通过环状单磷酸腺苷（cAMP）依赖性途径激活葡萄糖的快速释放。

  

  饭后，肝脏在胰岛素的作用下以糖原的形式储存过量的葡萄糖。在两餐之间（或禁食期间），刺激肝脏分解糖原以释放葡萄糖（糖原分解），并合成新的葡萄糖（糖异生）。然后葡萄糖被释放到血液中，以维持大脑和其他器官的正常功能。糖原分解和糖异生是由胰高血糖素等激素激活肝细胞中的环磷酸腺苷（AMP）通路，该cAMP促进代谢酶的激活，导致葡萄糖的产生和释放。

  

  有研究发现，表现出胰岛素抵抗和肥胖的患者血清中的Asprosin水平升高。接受减肥手术的肥胖患者手术后血清中的Asprosin水平下降。在对动物进行的药物性的Asprosin消耗实验中，初步结果提出了Asprosin用于治疗II型糖尿病和肥胖症的可能性。例如，Chopra及其同事观察到，将针对Asprosin的抗体注射到糖尿病小鼠体内时，血糖和胰岛素水平得到了改善。有报道称Asprosin能穿过血脑屏障，调节控制饥饿感和饱腹感的下丘脑中的神经元，抑制肥胖小鼠中的Asprosin会减少进食并导致体重减轻。

  

  小鼠elisa检测试剂盒操作步骤

  

  1. 标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。

  

  2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

  

  3. 加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。

  

  4. 温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。

  

  5. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。

  

  6. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

  

  7. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.

  

  8. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

  

  9. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。