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    纪宁实业在上海张江高科园区拥有独立实验室,公司主力提供的生化产品有:酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)、标准品、对照品、抗体、生化试剂、培养基、血清、细胞株、金标试剂盒等试剂产品。

--- 纪宁实业•上海•总部

  

技术支持

纪宁实业经过不断的实验优化和改进,积累了大量的经验,拥有专业的酶联研发团队。利用专业的酶联免疫技术自主研发的elisa试剂盒,能对血清及其 它样本定量检测抗原,定性检测特异性抗体。优质的试剂,先进的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA检测的方便性、稳 定性、重复性和可靠性方面都具有很大的优势。
酶联免疫吸附实验(ELISA)技术服务(1)

酶联免疫吸附测定法(ELISA) 是将已知抗原或抗体吸附在固相载体微孔聚苯乙烯塑料板上,通过抗原抗体特异性结合吸附待测样品中的抗体或抗原后,加酶标抗体 (酶与抗体或抗原结合后,既不改变抗体或抗原免疫反应的特异性,又不影响酶本身的活性)和底物后,在相应酶底物的作用下生成有色物质,其颜色深浅与标记物中相应的抗体或抗原的含量呈正比,由此可测定抗原或抗体的含量。一般为双抗体夹心和竞争法。

 
服务内容:
凡购买本公司任何一种酶免或放免检测试剂盒,您只需将您的样本、种属以及所要检测的指标及标本数量(48T、96T)通知我公司业务人员即可。我们就会为您提供详细的实验报告以及数据。我们保证对所售的任何产品一概负责到底,每一份实验结果都真实可靠
 
服务须知:
1.样本要求:液态类标本(细胞培养上清、组织匀浆、血清、血浆、尿液、胸水、腹水、脑积液等)
2.样本量:每个样本收集体积=120µl*检测指标数 。
3.  样本保存:请尽早检测,2-8℃保存一天;需更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集样本,请将样本及时分装标号后,置-20℃或-70℃保存。
4.服务时限和内容:收到样本之日起10个工作日之内提交实验结果,具体包括实验方法、步骤、所用试剂、仪器、相关数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您。
样本制备及注意事项:
1.细胞培养上清:2000-3000转/分离心20分钟后取上清;
2.组织匀浆:切割标本后,称重,按1:9生理盐水匀浆,5000转/分离心3-5分钟后取上清;
3.血清:样本室温放置2小时或4℃过夜后取上清;
4.血浆:可用EDTA、枸橼酸钠或肝素作为抗凝剂(根据试剂盒要求选择),样本加入10%抗凝剂混合10-20分钟,2000-3000转/分离心20分钟后取上清;
5.尿液、胸水、腹水、脑积液等:2000-3000转/分离心20分钟后取上清。
特别提醒:
1.取样和存样所用的冻存管、离心管、吸头等需高温灭菌处理;
2.所有存样管口需以封口膜封好;
3.所有样品管壁需要用防水记号笔清晰标明编号(便于区分即可);
4.所有样品避免反复冻融
5.如有特别要求,请与服务该区域的销售经理讲明。
好消息:我们可以为您的实验量身定做市场上没有的ELISA KIT,您只需要提供或让我们代买:包被抗体、检测抗体和蛋白标准品即可。

免疫组化技术服务(2)

【产品详情】

 

 免疫组化技术服

我们为您提供 免疫组织化学 IHC ,免疫细胞化学 ICC ,原位分子杂交ISH 等组织形态学方面的一站式技术服务,包括实验设计、实验操作、图片采集,实验结果分析等方面,也可以承接阶段性的技术服务。 检测指标:肿瘤标志物、癌基因及抑癌基因蛋白、细胞周期蛋白、凋亡基因蛋白、细胞表面抗原等。 样本及来源:石蜡切片、冰冻切片、细胞涂片或培养细胞;来源于人、小鼠、大鼠或其它。

1、组织的石蜡包埋与石蜡切片:

(1) 客户提供人或动物的新鲜或福尔马林固定的组织,负责进行石蜡包埋与组织切片,收费标准为 20 元/蜡块+ 10 元/张;

(2) 客户提供人或动物的石蜡包埋组织及处理好的玻片,制备石蜡切片,收费标准为 10 元/张

2、细胞片

客户提供生长良好的一瓶细胞,本公司提供传代培养的所有器材和处理好的玻片,制备细胞爬片,收费标准:100 元 / 批,每批可提供10 张左右细胞片。

3、常规 HE 染色:

客户提供石蜡或冰冻切片。
收费标准: 8 
元 / 
张(自带切片), 15 元 / 张(本公司切片)

4、免疫组织化学实验服务:

方法:使用 HRP 标记系统进行检测

项目

单位

 价格(元 )

备注

病理片免疫组化

 

 90(不含一抗)

上述费用不含摸索条件预实验费用

实验完毕后提供基本的实验方法,相关数据及示意性图片数张。

芯片免疫组化

 

200 (不含一抗)

同上

说明

1  用户委托我公司进行免疫组织化学检测实验时须一次性全额预付实验费。

2  用户应说明检测目的、所选检测系统等,一次送检样本数不应少于10张切片。我公司在正式接受实验委托二周左右交付实验结果。所提供实验结果忠实于样本的实际情况。

3  进行免疫组化检测实验所需的检测系统(不含一抗)由我公司免费提供,一抗须用户自行购买或委托我公司代购;用户所提供抗体应可与样本发生特异性识别反应。免疫组化检测显色系统分为辣根过氧化物酶-DAB体系及碱性磷酸酶-BCIP/NBT体系。

   由于用户提供的样品或试剂所致的实验问题由用户负责。我们的委托人可保留对于选择的服务的所有知识产权,每个项目都是在绝对保密的情况下进行的。

ELISA检测技术服务内容:
1、双抗体夹心法检测抗原 2、间接法检测抗体 3、为客户提供各种ELISA技术进行样本检测。

以上代测费,凡购买本公司试剂盒,我们免费代测!(3)
一,凡购买本公司目录任何一种酶联免疫检测试剂盒,您只需将需要检测的动物(Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……)种类和检测指标(白介素类、激素类)及标本数量(48T/96T)通知公司业务员即可。在接到客户标本当日起,现货产品一周内将检测报告交到 客户手中!
欢迎各科研单位在各种项目上与我们公司开展不同层次的密切合作,以双赢求发展,共同进步,为中国检测事业的发展积累经验。

二、样本要求
在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备 用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影 响实验质量,所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书,具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

液体类标本:标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

血清:室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

血浆:应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

尿液、胸腹水、脑脊液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.0-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右 (2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手 工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分 装后一份待检测,其余冷冻备用。

三、寄标本时需注明以下情况:
1、标本编号;2、所测项目;3、是否做复孔;3、联系方式;4、实验后标本是否寄回。

客户须知:
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
样品的收集与保存(4)

 腹水采集分成两类:

 
  1.活着抽取腹水
 
  2.处死抽取腹水
 
  活着抽取腹水主要用到的是酒精棉球与注射器(2-5ml) 以及灭后菌的eppendorf管(因为腹水还要分离所以用这个最好,便于离心)。方法就是用酒精棉球擦拭要进针的位置(大概是在腹部中线偏右侧处), 而后先让注射器中留点空气而后进针再将注射器慢慢往后推腹腔中有压力慢慢腹水会往外流,进针时要轻轻下上提一下,感觉无阻碍就好。
 
  处死抽取腹水就是用止血钳两把,剪刀小号2把,镊子2把即可。 先用剪刀镊子轻轻在小鼠腹腔外皮剪一个小口,而后用两把止血钳轻轻两边拉开,使露出腹部,而后用另一把剪刀镊子剪开内皮,用枪或玻璃直管即可去腹水。也建议放置eppendorf中。
 
  胸水的采集:
  主要采用胸腔穿刺法收集实验动物的胸水,也可处死实验动物剖开胸腔采集胸水。
 
  穿刺点定位:
  于实验动物脊侧腋后线第11~12肋间隙穿刺,穿刺针紧贴肋骨上缘,否则容易损伤肋间神经。此部位是肺最下界之外侧,既可避免损伤肺组织造成气胸,又易采集在隔肋窦的胸水。此外,也可在腹侧胸壁近胸骨左侧缘第4~5肋间隙穿刺。
 
  穿刺方法:
  实验动物取立位或半卧位固定,局部皮肤去毛、消毒、麻醉,穿刺针头与注射器之间接三通连接装置,实验人员以左手拇指、食指绷紧局部皮肤,右手握穿刺针紧*肋骨下缘处垂直进针,穿刺肋间肌时产生一定阻力,当阻力消失有落空感时,说明已刺入胸膜腔,用左手固定穿刺针,打开三通连接装置,缓慢抽取胸水。
 
  操作中严防空气进入胸腔,始终保持胸腔负压。穿刺应用手控制针头的深度,以防穿刺过深刺伤肺脏。
 
  建议保存在-80度冰箱。


SAMPLE COLLECTION AND STORAGE

 
  Cerebrospinal fluid (Csf)- Remove particulates by centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at ≤-20oC. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
 
  脑脊液:请离心后收集上清,并将标本保存于-20oC,且应避免反复冻融。


 SAMPLE COLLECTION AND STORAGE

 
  Urine - Aseptically collect the first urine of the day (mid-stream), voided directly into a sterile container. Centrifugeto remove particulate matter, assay immediately or aliquot and store at ≤-20oC. Avoid repeated freeze-thawcycles.
 
  尿液:请收集清晨第一次尿液(中段尿),或24 小时尿液,2000×g 离心15 分钟后收集上清,并将标本保存于-20oC,且应避免反复冻融。


 SAMPLE COLLECTION AND STORAGE

 
  Cell culture supernates and other biological fluids - Centrifuge samples for 20 minutes at 1000×g. Remove particulates and assay immediately or store samples in aliquot at -20oC or -80oC for later use. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
 
  细胞培养上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC或-80oC保存,但应避免反复冻融。


SAMPLE COLLECTION AND STORAGE

 
  Cell Lysates - Cells must be lysed before assaying according to the following directions.
 
  1.  Adherent cells should be detached with trypsin and then collected by centrifugation  (suspension cells can be collected by centrifugation directly).
 
  2.  Wash cells three times in cold PBS.
 
  3.  Resuspend cells in PBS (1×) and the cells was subject to ultrasonication for 4 times (or Freeze cells at ≤-20oC. Thaw cells with gentle mixing. Repeat the freeze/thaw cycle for 3 times.)
 
  4.  Centrifuge at 1500×g for 10 minutes at 2 - 8oC to remove cellular debris.
 
  细胞裂解液:
 
  1)贴壁细胞需要先用胰酶消化,离心收集细胞(悬浮细胞可直接离心收集);
 
  2)将收集到的细胞用冷PBS洗3次;
 
  3)物理方法裂解细胞(可先超声破碎细胞,再反复冻融):
 
  i 超声破碎:取适量PBS重悬细胞,用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂。
 
  ii 反复冻融:将待破碎的细胞在-20oC以下冰冻,室温融解,反复3次,使细胞溶胀破碎。
 
  4)将标本于2-8oC 1500×g离心10分钟,收集上清备用。



 组织匀浆:
 
  1) 取适量组织块,于预冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);
 
  2) 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果:首先将组织块移入玻璃匀浆器,加入5-10mL预冷PBS进行充分研磨,该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复2次)。
 
  3) 将制备好的匀浆液于5000×g离心5分钟,留取上清即可检测。


血浆标本的采集与保存血浆标本的采集与保存 SAMPLE COLLECTION AND STORAGE

 
  Plasma - Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant. Centrifuge samples for 15 minutes at 1000×g within 30 minutes of collection. Remove plasma and assay immediately or store samples in aliquot at -20oC or -80oC. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
 
  血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8oC 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC或-80oC保存,但应避免反复冻融。



 SAMPLE COLLECTION AND STORAGE

 
  Serum - Allow samples to clot for two hours at room temperature or overnight at 4oC before centrifugation for 20 minutes at approximately 1000×g. Assay immediately or store samples in aliquot at -20oC or -80oC. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
 
  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4oC过夜,然后1000×g离心20分钟,取上清即可,或将上清置于-20oC或-80oC保存,但应避免反复冻融。