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ELISA试验中血清标本留意事项五要点

来源:未知     时间:2019-12-02 08:55     浏览次数:

大部分elisa 检测均以血清为标本,那么在ELISA试验过程中血清标本有哪些留意事项呢?
    
具体留意事项:
1、要留意避免呈现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有相似过氧化物的活性,因此,在以HRP为符号酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,然后与后面加入的HRP底物反响显色。
 
2、样本的采集及血清别离中要留意尽量避免细菌污染,一则细菌的生长,其所排泄的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白发生分解效果;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作符号的测定方法发生非特异性搅扰。
 
3、血清标本如是以无菌操作别离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则主张冰冻保存。样本的长期保存,应在-70℃以下。
 
4、冰冻保存的血清标本须留意避免因停电等形成的重复冻融。标本的重复冻融所发生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发生损坏效果,然后引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应留意,不要进行剧烈振荡,重复倒置混匀即可。
 
5、标本在保存中如呈现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。