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纪宁带你了解原代细胞鉴定技术

来源:未知     时间:2020-11-11 10:18     浏览次数:

形态学鉴定
在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征
细胞染色检查 :
1 将无菌玻片置于细胞培养皿中,加细胞悬液后培养;
2.待细胞长满玻片后取出,用PBS清洗,之后放于载玻片上,待其自然干燥;
3.用PBS/甲醇(1:1)固定15分钟;
4.弃固定液,加合适的染色液染色;
5.染色完毕后用清水洗净,置于空气中干燥,
6.干燥后,用二甲苯透明,光学树脂封片后观察。

免疫组织细胞化学鉴定
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片;
2. PBS清洗标本3次,各1 分钟;
3. 4%多聚甲醛固定15分钟;
4. 置于空气中干燥;
5. PBS清洗标本3次,各2 分钟;
6. 0.5%Triton X-100孵育 1次20分钟;
7. PBS清洗标本 3次 各2分钟;
8. 3%H2O2孵育 15分钟;
9. DPBS清洗标本 3次 各2 分钟;


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